CY3.5-Desthiobiotin，CY3.5标记脱硫生物素的合成过程研究

CY3.5-Desthiobiotin，CY3.5标记脱硫生物素的合成过程研究

CY3.5-Desthiobiotin 是将花菁染料 Cy3.5 共价标记在脱硫生物素（Desthiobiotin）分子上的衍生物，将荧光可视化功能与生物素衍生物的高亲和性结合，为生物分子示踪、亲和纯化和化学研究提供多用途工具。Desthiobiotin 是一种生物素类似物，其结构中缺少硫原子，使其在与链霉亲和素（Streptavidin）结合时具有可逆性和可控的亲和力，从而在亲和捕获和释放实验中比天然生物素更灵活。Cy3.5 荧光团具有远红光吸收与发射特性（吸收峰约 570–580 nm，发射峰约 590–620 nm），通过标记 Desthiobiotin，可以实现高灵敏度荧光示踪及定量分析。

CY3.5-Desthiobiotin 的合成过程通常包括 Desthiobiotin 的活化、Cy3.5 偶联以及产物纯化三个主要环节。首先，Desthiobiotin 分子中可用于偶联的羧基或氨基官能团需通过化学活化。常用方法是使用 EDC/NHS 或 sulfo-NHS 等水溶性偶联试剂，将羧基活化为活化酯中间体，增强其亲电性，使其能够与 Cy3.5 的亲核基团（氨基或肼基）发生共价结合。活化过程通常在缓冲液体系中进行，pH 控制在 6–8 范围，以保证羧基的活性和 Cy3.5 荧光团的稳定性。

随后进行 Cy3.5 偶联反应。Cy3.5-NH₂ 或 Cy3.5-hydrazide 作为亲核试剂进攻 Desthiobiotin 活化酯的碳原子，形成过渡态后离去基团脱离，生成稳定的酰胺键或肼键，实现荧光团与 Desthiobiotin 的共价结合。为了减少荧光猝灭和空间阻碍，通常在 Cy3.5 与 Desthiobiotin 之间引入柔性连接子，使荧光团与分子核心保持适当距离，同时保持化学反应效率和荧光稳定性。反应一般在室温条件下完成，以保护 Cy3.5 荧光团和 Desthiobiotin 的结构完整性。

反应完成后，需要对产物进行纯化，以去除未反应的 Cy3.5、残余活化试剂及副产物。纯化方法常采用透析、凝胶过滤或高效液相色谱（HPLC），利用分子量差异或亲和特性进行分离，同时保证标记产物的荧光性能和分子完整性。纯化后的产物可通过 UV-Vis 光谱测定 Cy3.5 吸收峰，荧光光谱检测远红荧光发射性能，进一步评估偶联效率和荧光稳定性。

此外，可通过质谱或核磁共振（NMR）分析验证 Cy3.5 与 Desthiobiotin 的化学结合，确保标记产物结构正确。动态光散射（DLS）或溶液稳定性测试可评估产物在水相体系中的分散性和稳定性，为后续生物实验和功能化应用提供基础数据。

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产品名称：CY3.5-Desthiobiotin

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

厂家：良林生物

产品目录

水溶性花菁染料CY3标记炔烃 Sulfo-Cy3-alkyne

水溶性花菁染料CY3标记四氮杂卓 Sulfo-CY3-tetrazine

水溶性花菁染料CY3标记羧酸 Sulfo-Cy3-COOH

水溶性花菁染料CY3标记羧酸 Sulfo-Cy3-COOH 146368-13-0

水溶性花菁染料CY3标记酰肼 Sulfo-CY3-hydrazide

仅用于科研，不能用于人体。小编axc