Cy3-GSTP1，GSTπ，CY3标记的谷胱甘肽S转移酶π的合成过程研究

Cy3-GSTP1，GSTπ，CY3标记的谷胱甘肽S转移酶π的合成过程研究

CY3-GSTP1（GSTπ，CY3 标记的谷胱甘肽 S-转移酶 π）是通过将橙红色荧光染料 Cy3 共价连接到 GSTP1 蛋白分子上形成的荧光标记蛋白。GSTP1 是一种重要的谷胱甘肽 S-转移酶家族成员，参与细胞内解毒反应，通过催化谷胱甘肽（GSH）与各种电亲性化合物的结合，帮助细胞排除有害代谢物和外源化学物质。CY3 标记的 GSTP1 在保持蛋白催化活性和结构完整性的同时，获得光学示踪能力。Cy3 的吸收峰约在 550 nm，发射峰约在 570 nm，信号亮度高且稳定，可用于荧光显微镜、流式细胞分析或多通道成像系统追踪 GSTP1 在溶液体系、细胞或材料中的分布和动态行为。标记位点通常选择在蛋白表面非活性残基，如赖氨酸或半胱氨酸，以避免干扰 GSTP1 的催化中心或谷胱甘肽结合位点。

CY3-GSTP1 的合成过程研究主要关注标记策略、反应条件和蛋白功能保持。通常采用 Cy3 活性衍生物，如 N-羧基琥珀酰亚胺酯（NHS-ester）或马来酰亚胺衍生物，与 GSTP1 表面的氨基或巯基残基发生共价结合。NHS-ester 与赖氨酸氨基反应生成稳定的酰胺键，而马来酰亚胺衍生物与半胱氨酸巯基形成稳定硫醚键。为了保证蛋白折叠与催化活性，反应通常在温和缓冲体系（如 PBS 或 HEPES，pH 7.0–8.5）中进行，温度控制在 4–25°C。通过适量的 Cy3 衍生物和适宜的反应时间，可获得理想标记效率，同时避免过度修饰导致蛋白结构破坏或催化活性降低。

在合成过程中，柔性连接臂的设计有助于 Cy3 荧光团在空间上保持一定自由度，减少对蛋白活性中心的空间阻碍，同时保证荧光信号稳定。反应完成后，通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱（HPLC）进行纯化，去除未反应的 Cy3 分子和副产物。纯化后的 CY3-GSTP1 可通过荧光光谱验证标记成功，吸收和发射峰与 Cy3 标准一致，确保荧光性能；同时通过 SDS-PAGE 和荧光扫描评估分子量及标记均一性，并利用质谱或核磁共振（NMR）分析确认标记位点及蛋白结构完整性。

合成过程研究还涉及功能验证，通常通过谷胱甘肽结合实验或底物转移活性实验确认标记后的 GSTP1 保持其酶学活性。荧光标记的 CY3-GSTP1 可用于追踪蛋白在细胞内的分布、靶向定位以及与药物或小分子底物的相互作用，为细胞解毒机制、药物代谢研究和蛋白工程提供可视化工具。

总之，CY3-GSTP1 是通过 Cy3 荧光团与 GSTP1 蛋白表面氨基或巯基共价结合形成的复合分子，其合成过程研究包括标记策略设计、温和缓冲反应、柔性连接臂应用、纯化及结构和功能表征。该标记体系兼具 GSTP1 功能活性和光学示踪特性，可用于细胞分布追踪、酶活性分析及蛋白-小分子相互作用研究，为生物化学、药物研究及分子生物学实验提供可靠、高效的实验工具。

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产品名称：CY3-GSTP1

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

厂家：良林生物

产品目录

CY7.5-propofol CY7.5标记丙泊酚

CY7.5-protopanaxatriol CY7.5标记人参皂苷

CY7.5-PTX CY7.5紫杉醇

CY7.5-Quercetin CY7.5槲皮素

仅用于科研，不能用于人体。小编axc