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CY3-Nucleohistone,CY3标记的核组蛋白可用于研究染色质结构

2025-12-08 分享

CY3-Nucleohistone,CY3标记的核组蛋白可用于研究染色质结构

CY3-Nucleohistone(CY3 标记的核组蛋白)是通过将橙红色荧光染料 Cy3 共价连接到核组蛋白复合物上形成的荧光标记分子。核组蛋白是构成真核细胞染色质的基本蛋白复合物,由组蛋白 H1、H2A、H2B、H3 和 H4 组成八聚体核心,包裹约 147 个碱基对 DNA,形成核小体。核组蛋白不仅维持染色质的结构完整性,还参与 DNA 复制、转录调控、修饰信号传递及染色质重塑等过程。通过在核组蛋白分子上引入 Cy3 标记,可在保持组蛋白复合物构象和 DNA 结合能力的前提下获得光学可追踪功能。Cy3 的吸收峰约在 550 nm,发射峰约在 570 nm,信号亮度高、光稳定性好,可通过荧光显微镜、光谱分析及多通道成像系统观察 CY3-Nucleohistone 在溶液、细胞核或染色质体系中的分布及动态变化。标记位点通常选择在核组蛋白表面非活性氨基或半胱氨酸残基,以避免干扰 DNA 结合区域或组蛋白尾部可修饰位点。

CY3-Nucleohistone 的结构合成通常遵循以下步骤:首先,制备核组蛋白复合物(nucleosome core particle, NCP),通过体外重组方法将纯化的组蛋白八聚体与 DNA 片段组装形成核小体。然后,选择活性 Cy3 衍生物,如 N-羧基琥珀酰亚胺酯(NHS-ester)或马来酰亚胺衍生物,针对核组蛋白表面的氨基或巯基残基进行共价标记。在反应前,可对关键功能区域进行保护,以避免 Cy3 与 DNA 结合域或组蛋白尾部重要赖氨酸发生非特异性反应。反应一般在温和缓冲体系中进行(如 PBS 或 HEPES,pH 7.0–8.5),温度保持在 4–25°C,以维持核组蛋白复合物的空间构象和 DNA 结合能力。

标记设计通常采用柔性连接臂,将 Cy3 荧光团与核组蛋白分子表面连接,使荧光团在空间上具有一定自由度,避免对 DNA 结合位点和核小体折叠产生阻碍。反应完成后,通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱(HPLC)纯化 CY3-Nucleohistone,以去除未反应的 Cy3 分子及副产物,获得高纯度、均一的荧光标记复合物。纯化后的产物可通过荧光光谱确认标记成功,并通过质谱或核磁共振(NMR)分析验证标记位点和蛋白复合物结构完整性。同时,通过原子力显微镜(AFM)或电子显微镜(EM)可观察标记核小体的整体形态和 DNA 包裹情况。

CY3-Nucleohistone 在结构和功能上保持了天然核小体的特点,可用于研究染色质结构、组蛋白修饰及 DNA-蛋白相互作用的动态过程。荧光标记使其能够直观监测核小体在体外重组体系、细胞核或染色质模型中的分布与迁移,为染色质动力学、表观遗传调控和分子相互作用分析提供可视化工具。通过多通道实验,可同时追踪 CY3-Nucleohistone 与其他标记蛋白或 DNA 片段的相互作用,实现复杂体系的分子行为分析。

总之,CY3-Nucleohistone 是通过 Cy3 荧光团与核组蛋白复合物共价结合形成的复合分子,其结构合成包括核小体重组、选择性标记、柔性连接臂设计、温和反应条件及纯化表征。该标记体系兼具核组蛋白复合物功能与光学示踪特性,可用于染色质结构研究、蛋白-DNA 相互作用分析及分子示踪实验,为生物化学、分子生物学及表观遗传学研究提供可靠、高效的实验工具。

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产品名称:CY3-Nucleohistone

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

厂家:良林生物

CY3-Nucleohistone

产品目录

CY7.5-Rapamycin CY7.5标记雷帕霉素

CY7.5-Retapamulin CY7.5瑞他莫林

CY7.5-Rifampicin CY7.5利福平

CY7.5-SBA CY7.5标记大豆凝集素

CY7.5-Schaftoside  CY7.5标记夏佛塔苷

仅用于科研,不能用于人体。小编axc