CY3-Succinylated Keyhole Limpet，CY3标记的琥珀酰化血蓝蛋白的合成过程

CY3-Succinylated Keyhole Limpet，CY3标记的琥珀酰化血蓝蛋白的合成过程

CY3-Succinylated Keyhole Limpet Hemocyanin（CY3 标记的琥珀酰化血蓝蛋白，简称 CY3-KLH）是通过将橙红色荧光染料 Cy3 共价修饰到琥珀酰化后的血蓝蛋白分子上形成的荧光标记蛋白。血蓝蛋白（Keyhole Limpet Hemocyanin, KLH）是一种高分子量的多亚基铜蛋白，广泛用于免疫学研究和载体蛋白系统。琥珀酰化修饰是将 KLH 表面的氨基残基部分转化为羧基，通过与琥珀酸衍生物反应引入负电荷，同时保留蛋白质的整体折叠结构和免疫原性。CY3 标记的 KLH 既保持了蛋白骨架和亚基构象，又具备可视化荧光特性，适用于抗体制备、免疫标记和细胞追踪等实验。Cy3 的吸收峰约在 550 nm，发射峰约在 570 nm，光学信号稳定、亮度高，可用于荧光显微镜、多通道成像或流式细胞分析系统中追踪 KLH 的分布和行为。

CY3-KLH 的合成过程通常包括琥珀酰化修饰、荧光标记及纯化步骤。首先，对 KLH 蛋白进行琥珀酰化处理，通常在温和缓冲体系（如碳酸盐缓冲液，pH 8.0–8.5）中，将蛋白表面的赖氨酸氨基与琥珀酸酐反应生成酰胺键，引入羧基以增加负电性，同时减少非特异性结合位点。这一步骤有助于改善蛋白质在后续标记和生物体系中的分散性和稳定性。反应时间和琥珀酸酐用量经过优化，以保持蛋白质结构和免疫活性。

随后，将 Cy3 活性衍生物（如 N-羧基琥珀酰亚胺酯，NHS-ester）与琥珀酰化 KLH 的羧基或部分未反应的氨基残基进行共价结合。反应在温和缓冲体系（pH 7.0–8.5）中进行，温度控制在 4–25°C，以维持蛋白质折叠和多亚基复合体结构。为了避免对蛋白质构象的破坏，常采用适量 Cy3 活性分子，并通过柔性连接臂设计，使荧光团在空间上具有自由度，减少对蛋白表面空间位阻的影响，同时保证荧光信号的稳定性。

标记反应完成后，通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱（HPLC）对 CY3-KLH 进行纯化，去除未反应的 Cy3 分子及副产物，获得高纯度、均一的荧光标记蛋白。纯化后的产物呈橙红色荧光溶液，水溶性良好，易于在免疫学或细胞实验体系中应用。纯化与表征通常通过荧光光谱确认标记成功，吸收和发射峰与 Cy3 标准一致；通过 SDS-PAGE 或凝胶扫描评估分子量和标记均一性；质谱或核磁共振（NMR）分析可进一步确认标记位点和化学结构完整性。

CY3-KLH 的荧光标记及琥珀酰化修饰保证了蛋白在生物实验中的稳定性和示踪功能，可用于抗体生成、免疫分析、细胞追踪以及多通道荧光实验。其水溶性、负电性和荧光稳定性使其能够与各种细胞、纳米载体或生物材料兼容，同时保留免疫原性和蛋白结构完整性，为生物化学、免疫学及分子标记研究提供可靠、高效的实验工具。

总之，CY3-Succinylated KLH 是通过对 KLH 进行琥珀酰化处理后，再与 Cy3 活性衍生物共价结合形成的复合分子。其合成及纯化过程包括蛋白琥珀酰化、荧光标记、柔性连接臂设计以及透析或 HPLC 纯化，最终产物兼具蛋白功能和光学示踪特性，可广泛用于免疫学、分子示踪及细胞实验，为相关研究提供可靠、高效的工具。

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产品名称：CY3-Succinylated Keyhole Limpet

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

厂家：良林生物

产品目录

CY7.5-SH  CY7.5巯基 花菁染料CY7.5标记巯基

CY7.5-Silk fibroin  CY7.5丝素蛋白

CY7.5-Streptavidin CY7.5标记链霉亲和素

CY7.5-sucrose CY7.5标记蔗糖

仅用于科研，不能用于人体。小编axc