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CY3-Actin,CY3标记的肌动蛋白的化学结构特点

2025-12-08 分享

CY3-Actin,CY3标记的肌动蛋白的化学结构特点

CY3-Actin(CY3 标记的肌动蛋白)是通过将橙红色荧光染料 Cy3 共价修饰到肌动蛋白分子上形成的荧光标记蛋白。肌动蛋白是一种高度保守的球状蛋白(G-actin),可聚合形成微丝(F-actin),在细胞中参与细胞骨架构建、胞内运输、细胞迁移和信号传导等多种重要生物学过程。通过将 Cy3 引入肌动蛋白分子,可在保留蛋白功能和聚合能力的前提下获得可视化荧光信号,便于体外实验和细胞内动态追踪。Cy3 的吸收峰约在 550 nm,发射峰约在 570 nm,光学信号稳定且亮度高,可通过荧光显微镜、多通道成像或流式细胞分析系统实时观察肌动蛋白的空间分布、聚合和动力学变化。标记位点通常选择在肌动蛋白分子表面的赖氨酸或半胱氨酸残基,避免干扰肌动蛋白的 ATP 结合位点或 F-actin 聚合界面,以保持其生物学活性。

CY3-Actin 的化学结构特点在于荧光团通过柔性连接臂与蛋白质分子共价结合。Cy3 活性衍生物通常包括 N-羧基琥珀酰亚胺酯(NHS-ester)或马来酰亚胺衍生物,可分别与肌动蛋白表面的氨基或巯基残基形成稳定的酰胺键或硫醚键。柔性连接臂的引入使荧光团在空间上具有一定自由度,减少对蛋白构象、聚合接口和 ATP 结合位点的阻碍,从而保证 CY3-Actin 的生物学功能和聚合能力。标记比例一般经过优化,以获得足够的荧光信号同时避免过度修饰导致蛋白失活或聚合效率降低。

CY3-Actin 的化学结构特点还体现在其双重功能性:一方面保留肌动蛋白的天然结构和 ATP/G-actin 聚合能力,使其能够形成 F-actin 纤维和参与细胞骨架动力学;另一方面荧光团提供稳定、可定量的光学信号,可用于微丝动力学研究、细胞形态观察及蛋白质-蛋白质相互作用分析。在制备过程中,反应通常在温和缓冲体系(如 50 mM PBS,pH 7.0–8.5)中进行,温度保持在 4–25°C,以维持蛋白结构稳定性。反应完成后,产物可通过透析或凝胶过滤去除未反应的 Cy3 分子,获得高纯度标记蛋白。

纯化和表征方面,CY3-Actin 可通过荧光光谱验证标记成功,质谱和 SDS-PAGE 分析可确认分子量和标记均一性,同时通过体外聚合实验或显微镜观察 F-actin 纤维形成能力,确保标记不影响蛋白功能。荧光标记还可用于共聚焦显微镜或多通道成像实验,与其他荧光标记分子联合使用,实现复杂细胞体系中肌动蛋白的动态追踪和相互作用研究。

总之,CY3-Actin 是通过 Cy3 荧光团与肌动蛋白分子共价结合形成的复合分子,其化学结构特点在于荧光团通过柔性连接臂与蛋白表面氨基或巯基共价结合,兼具蛋白功能和光学示踪特性。该标记体系能够保持肌动蛋白的聚合能力和生物学活性,同时提供稳定、高亮的荧光信号,可用于细胞骨架研究、微丝动力学分析及蛋白相互作用追踪,为细胞生物学和分子生物学实验提供可靠、高效的实验工具。

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产品名称:CY3-Actin

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

厂家:良林生物

CY3-Actin

产品目录

CY7.5标记阿兹夫定 CY7.5-Azvudine

CY7.5标记白桦脂酸 CY7.5-Betulinic acid

CY7.5标记丙泊酚 CY7.5-propofol

CY7.5标记丙烯酸羟乙酯 CY7.5-2-Hydroxyethyl acrylate

CY7.5标记布比卡因 CY7.5-Bupivacaina

仅用于科研,不能用于人体。小编axc