CY3-Proteinase-K,CY3标记的蛋白酶K的功能与应用
CY3-Proteinase-K,CY3标记的蛋白酶K的功能与应用
CY3-Proteinase-K(CY3 标记的蛋白酶 K)是将蛋白酶 K 分子通过化学方法共价连接 Cy3 荧光染料形成的标记体系,用于分子生物学研究、荧光检测及酶动力学分析。蛋白酶 K 是一种广谱丝氨酸蛋白酶,来源于真菌,分子量约 28–30 kDa,能够水解各种蛋白质底物,包括天然和变性蛋白,对酶解条件适应性强,耐受温和热、去污剂及 SDS。Cy3 为三甲烯型花菁染料,由两个氮杂芳香环通过多甲烯链形成 π 共轭结构,吸收峰约 550 nm,发射峰约 570 nm,为蛋白酶 K 提供稳定荧光信号,实现可视化追踪和定量分析。
CY3-Proteinase-K 的功能主要包括酶解活性保持与荧光标记功能双重特性。标记过程中,Cy3 通常以 NHS 酯形式或点击化学活化形式与蛋白酶 K 分子上的赖氨酸氨基或 N 端氨基共价结合,形成稳定的酰胺键。标记设计注重避免干扰蛋白酶活性位点,使酶在底物识别和催化过程中仍保持原有功能。柔性连接臂使荧光团在水相中具有旋转自由度,减少淬灭,同时保持蛋白酶的溶解性和结构稳定性。
CY3-Proteinase-K 的应用优势主要体现在以下几个方面:
一、酶动力学研究:标记后的蛋白酶 K 可以在荧光检测体系中进行活性监测,通过荧光强度或能量转移变化,实时观察酶与底物的相互作用、酶解速率及反应动力学,为酶催化机制研究提供直观数据。
二、底物与蛋白交互分析:CY3-Proteinase-K 可用于研究蛋白-蛋白或蛋白-多肽底物的酶解行为。荧光标记使底物降解过程可视化,同时可通过荧光共聚焦显微镜、流式细胞仪或荧光板读数仪进行定量分析,便于研究底物降解位置、速率及受体依赖性。
三、分子追踪与定位:标记后的蛋白酶可在体外细胞实验或微环境中追踪酶的分布和活性。荧光信号能够直观显示蛋白酶进入细胞或亚细胞区室的路径,为研究酶在胞内外环境中的作用机制提供实验依据。
四、生物兼容性与稳定性:CY3-Proteinase-K 在缓冲液和细胞实验条件下保持良好溶解性和酶活性,荧光信号稳定,耐受温和光照和实验操作条件。标记设计避免聚集和荧光淬灭,使蛋白酶在实验过程中功能稳定、可重复使用。
五、多功能实验应用:CY3-Proteinase-K 可结合底物标记体系进行双荧光检测,或在蛋白组学和降解分析中用于高通量筛选。其兼具酶活性和可视化功能,使其在蛋白质降解机制研究、酶动力学分析及荧光检测方法开发中具有重要价值。
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产品名称:CY3-Proteinase-K
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
厂家:良林生物

产品目录
CY7-COOH cy7羧基
CY7-COOH CY7羧基
CY7-Curcumin CY7姜黄素
CY7-Cysteine CY7修饰半胱氨酸
CY7-DA CY7标记多巴胺
仅用于科研,不能用于人体。小编axc