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FITC-Bovine Serum Albumin的合成方法与质控

2025-12-10 分享

产品名称:FITC-Bovine Serum Albumin的合成方法与质控

1. 合成方法与质控

合成工艺:

反应条件:在碱性缓冲液(如0.5M碳酸钠-碳酸氢钠,pH 9.0-9.5)中,FITC与BSA按质量比1:10-1:20混合,避光反应2-8小时(室温/4℃)。

纯化步骤:通过透析、凝胶过滤或HPLC去除游离FITC,确保产物纯度;F/P比例(荧光素与蛋白摩尔比)需控制在2.5-6.5,避免过度标记导致聚集。

表征验证:紫外-可见光谱、荧光光谱、质谱及电泳确认结构与标记效率。

2. 核心应用领域

细胞与组织成像:

膜标记与内吞研究:追踪细胞表面受体(如网格蛋白介导的内吞)、细胞内结构(如溶酶体、线粒体)及膜运输机制。

流式细胞术:分选BSA受体阳性细胞,分析细胞表面蛋白表达水平。

共聚焦显微镜:可视化细胞内荧光分布,研究蛋白质定位与动态过程。

免疫分析与检测:

ELISA/免疫荧光:作为检测标记物,监测抗体-抗原结合或组织切片中的蛋白定位。

荧光标准品:校准荧光设备,评估仪器灵敏度与线性范围。

药物递送与载体研究:

载体示踪:标记脂质体、纳米粒等载体,追踪药物在体内的分布、代谢与靶向释放。

药物相互作用:研究药物与BSA的结合亲和力及构象变化(如FRET技术)。

蛋白质相互作用研究:

FRET/Pull-down实验:与Cy3、Cy5等染料联用,研究蛋白质-蛋白质相互作用距离;作为“诱饵”蛋白捕获靶分子。

分子识别:分析配体-受体结合、酶-底物相互作用等生物过程。

3. 优势与局限性

优势:

荧光稳定性与灵敏度:FITC的绿色荧光信号强且稳定,适合低浓度检测与长时间观察。

生物相容性与多功能性:BSA的天然属性支持活体实验,复合物可应用于细胞标记、免疫分析、药物递送等多场景。

易标记与检测:合成工艺成熟,兼容多种荧光检测设备。

局限性:

光敏感性:FITC易受光漂白影响,需严格避光操作。

批次差异:合成条件(如pH、温度、比例)影响标记效率,需严格质控。

非特异性结合:在复杂生物样本中可能存在背景吸附,需优化实验条件(如封闭剂使用)。

成本与操作复杂度:合成与纯化需专业设备,成本较高。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

FITC-Bovine Serum Albumin

关于我们:

良林科研服务平台是西安瑞胜生物科技有限公司旗下的品牌,良林科研服务平台致力于服务全球研发工作者,公司配备了化合物合成、纯化、冻干、质量检测与分析等精密仪器,良好有完备的生产,研发,检测全生产线的能力。良林生物致力于为客户提供有机化合物定制合成及生产服务。 我公司生产销售科研级别的药物传递和药物纳米靶向方面的产品,公司目前经营的产品主要有合成磷脂,PEG衍生物,嵌段共聚物,纳米金,磁性纳米颗粒,介孔二氧化硅,活性荧光染料,荧光量子点,点击化学和大环配体等等。


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