956579-01-4,IRDye 800活性酯的物理化学性质
产品名称:956579-01-4,IRDye 800活性酯的物理化学性质
核心组成与结构
化学本质:IRDye 800 NHS ester(中文名:IRDye 800琥珀酰亚胺酯),分子式C₅₀H₅₄N₃Na₃O₁₇S₄,分子量1166.2。结构由两部分构成:
荧光团:对称型花菁染料(Cyanine dye),高度共轭体系赋予近红外(NIR)强吸收与发射能力(激发峰774-785 nm,发射峰794-810 nm,量子产率>0.8)。
活性基团:NHS酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯),可与生物分子(如蛋白质、抗体、多肽)的伯胺(-NH₂)共价结合,形成稳定酰胺键。
物理化学性质
外观:深蓝色或深绿黑色固体粉末,易溶于DMSO、DMF、乙醇,部分溶于PBS(pH 7.5-8.5,需含少量有机助溶剂)。
稳定性:避光、低温(-20°C)保存,避免反复冻融;硫脲键在生理环境中稳定,光漂白速率低(连续曝光1000帧后荧光强度衰减<15%)。
荧光特性:近红外光穿透生物组织能力强,散射和吸收低,适用于活体成像及深部组织分析;背景干扰小,信噪比高。
合成与质控
标记原理:NHS酯与生物分子氨基在弱碱性条件(pH 7.5-8.5,20-25℃)下反应,形成酰胺键。反应后需通过透析、凝胶过滤或HPLC纯化,去除未结合染料。
质控标准:F/P比例(荧光素与蛋白摩尔比)控制在2.5-6.5,确保标记效率≥90%;通过紫外-可见光谱、荧光光谱、质谱及电泳验证结构与活性。
核心应用领域
生物成像与检测:
蛋白质/抗体标记:用于Western blot、免疫荧光、流式细胞术,如标记β-淀粉样蛋白检测阿尔茨海默病(检测限0.1 pg/mL,灵敏度较ELISA高100倍)。
活体成像:近红外特性支持小动物体内追踪,如肿瘤靶向治疗中药物递送系统的分布监测。
外泌体研究:标记外泌体膜蛋白,通过共聚焦显微镜或NIR-II成像系统追踪其摄取与分布。
分子探针开发:作为荧光探针用于细胞内蛋白质分析、组织切片成像及光学探针设计,兼容多色成像(如与Cy5、AF488联用)。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

关于我们:
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