APF,氨基苯基荧光素的核心应用场景,359010-70-1
产品名称:APF,氨基苯基荧光素的核心应用场景,359010-70-1
结构特性
分子结构:荧光素母核(C₂₆H₁₇NO₅,分子量423.42),苯环上引入氨基取代基,激发波长490 nm,发射波长515 nm,呈现明亮绿色荧光,量子产率高。氨基基团可与羧基、异氰酸酯、琥珀酰亚胺酯等官能团共价偶联,实现蛋白质、核酸、多肽等生物分子的荧光标记。
稳定性:在pH 7-10的缓冲体系中荧光稳定,pH<6时荧光强度显著下降;耐光诱导自氧化,水溶液中稳定,-20℃避光保存可维持1-2年活性。
溶解性:溶于DMSO(10 mM)、DMF(5 mM),需现配现用,稀释液不可储存。
核心应用场景
生物分子标记:用于抗体、抗原、酶、核酸的荧光修饰,制备探针用于免疫分析、核酸杂交、流式细胞术、荧光显微镜等。
ROS动态监测:特异性检测高活性氧(hROS),如羟基自由基(·OH)、过氧亚硝酸盐(ONOO⁻)、次氯酸盐(-OCl)。与HPF联用可区分次氯酸盐与一氧化氮、超氧化物,适用于活细胞/组织内氧化应激研究(如肿瘤微环境、神经炎症、心肌缺血-再灌注损伤)。
药理与毒理学研究:评估药物或化学物质的氧化应激影响,筛选抗氧化剂,分析毒性机制。
环境检测:通过荧光信号变化快速检测重金属离子、有机污染物等环境污染物。
实验操作要点
储存与溶解:-20℃避光密封保存,避免反复冻融;使用前室温回温20分钟,溶于无水DMF/DMSO配制储存液,分装后-20℃避光保存。
反应条件:在PBS/MES缓冲液(pH 6.5-8.0)中,通过酰胺化/席夫碱反应与目标分子偶联,工作浓度1-10 μM,37℃孵育20-60分钟。
缓冲体系:使用无氨基缓冲液(如HEPES、PBS),避免BSA、酚红等干扰荧光;添加钙离子载体(如Ionomycin)可增强信号响应。
对照设置:阴性对照(未处理样本)排除自发荧光,阳性对照(已知hROS刺激样本)验证探针活性。
防护措施:全程避光操作,佩戴手套/护目镜,废弃物按化学废弃物处理。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

关于我们:
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