CY3-HSA,CY3标记人血清白蛋白的反应条件
CY3-HSA,CY3标记人血清白蛋白的反应条件
Cy3-标记人血清白蛋白(Cy3-HSA) 是通过将荧光染料 Cy3 共价连接到人血清白蛋白(Human Serum Albumin, HSA)分子上形成的荧光复合物,用于蛋白追踪、细胞摄取分析、药物载体示踪及荧光成像实验。HSA 是血浆中最丰富的可溶性蛋白,分子量约 66 kDa,由 585 个氨基酸组成,主要由 α 螺旋构成,表面暴露大量赖氨酸、半胱氨酸及羟赖氨酸残基,这些侧链提供了 Cy3 共价标记的理想化学位点。Cy3-HSA 通过荧光信号与蛋白功能结合,使研究者能够在体外或体内实验中直观观察蛋白分布、运输和吸收动态。
反应条件方面,Cy3-HSA 的标记通常采用 Cy3-NHS 酯或 Cy3-maleimide 与 HSA 的赖氨酸 ε-氨基或半胱氨酸巯基反应形成稳定共价键。反应通常在温和缓冲体系中进行,如 PBS(磷酸盐缓冲液)或碳酸氢盐缓冲液,pH 7–8 为最佳条件,这既保证蛋白的折叠和功能保持,又为 NHS 酯活化提供适宜的碱性环境。反应温度一般控制在 4–25℃,低温可减少蛋白降解和荧光染料自聚。反应时间根据染料与蛋白摩尔比可在 30 分钟至数小时内完成,通过优化摩尔比,可控制标记密度以保证荧光强度和蛋白功能的平衡。
反应过程中,HSA 溶液需保持均匀混合,并尽量避免光照,以防 Cy3 荧光淬灭。标记完成后,通过透析、凝胶过滤或超滤去除未反应的自由染料,获得高纯度 Cy3-HSA。产物通常表现为水溶性良好、分散均匀,荧光信号稳定,可在多种缓冲体系中保存。为进一步保证反应效果,可在反应前将 HSA 轻微去氧化或保护活性巯基,避免副反应生成不溶聚集体。
Cy3-HSA 的反应条件设计强调温和性、选择性和可控性。温和性保证蛋白折叠结构和结合位点不受破坏,选择性确保染料主要结合在表面氨基或巯基而不干扰 HSA 的疏水口袋或药物结合位点,可控性通过调节 Cy3 与 HSA 摩尔比、pH、温度及反应时间实现。反应完成后,标记产物可直接用于细胞摄取实验、药物载体追踪、血浆蛋白分布研究以及荧光成像分析。
此外,Cy3-HSA 的反应条件考虑了水溶性和生物相容性。HSA 具有天然亲水性,Cy3 的亲水取代基增加溶解性,使标记后的蛋白在体外和体内实验中均保持稳定状态,避免沉淀或聚集。温和反应条件和适宜的缓冲体系还保证了荧光信号的持久性,可在显微镜观察、流式分析或荧光光谱检测中保持稳定。
良林生物供应磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、磁性纳米颗粒、纳米金、近红外荧光染料、荧光量子点、碳纳米管、石墨烯及多种功能高分子材料。如有需求可咨询
产品名称:CY3-HSA,CY3标记人血清白蛋白
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
厂家:良林生物

产品目录
Cyanine7.5标记靶向肽PTP CY7.5-PTP
CY标记重楼皂苷聚糖 CY-重楼皂苷Polyphyllin
DiD,细胞膜远红外荧光探针,
DiI,细胞膜红色荧光探针,
DiO ,细胞膜绿色荧光探针,
DiR,细胞膜深红色荧光探针,
仅用于科研,不能用于人体。小编axc