CY3-Lyticase,10U,CY3标记溶壁酶的反应机理
CY3-Lyticase,10U,CY3标记溶壁酶的反应机理
Cy3-标记溶壁酶(Cy3-Lyticase, 10 U/µL) 是将荧光染料 Cy3 共价连接到溶壁酶(Lyticase)分子上形成的荧光复合物,用于细胞壁降解研究、酵母或真菌细胞壁结构分析以及荧光可视化追踪。溶壁酶是一类能够水解酵母及其他真菌细胞壁β-1,3-葡聚糖链的水解酶,分子量范围一般在 30–60 kDa,由多个催化和结合结构域组成,含有丰富的赖氨酸、半胱氨酸和其他可反应氨基酸残基,为 Cy3 的共价标记提供理想位点。Cy3-Lyticase 结合了酶催化活性和荧光信号,使研究者能够在体外或细胞体系中实时观察酶与细胞壁的相互作用及降解过程。
反应机理方面,Cy3-Lyticase 的荧光标记通常采用 Cy3-NHS 酯或 Cy3-maleimide 与酶分子表面的赖氨酸 ε-氨基或半胱氨酸巯基发生共价结合。NHS 酯基团通过亲核加成与赖氨酸氨基反应,形成稳定的酰胺键;maleimide 基团通过 Michael 加成与半胱氨酸巯基形成稳定的硫醚键。这些反应均在温和缓冲体系(pH 7–8)中进行,低温避光,保证酶折叠稳定和催化活性不受破坏。通过调控染料与酶的摩尔比,可获得可控的标记密度,兼顾荧光信号强度与酶活性保持。
溶壁酶的催化机制涉及对β-1,3-葡聚糖键的水解。酶的活性中心包含氨基酸残基,可通过酸碱催化或形成中间体碳阳离子,使β-1,3-糖苷键断裂,从而降解细胞壁。Cy3 的共价标记通常选择酶表面非活性位点,避免干扰活性中心,使荧光标记后的 Lyticase 保持对酵母或真菌细胞壁的催化能力。标记后的荧光信号可用于观察酶与细胞壁结合位置、动力学和降解效率,为酶学研究提供直观数据。
Cy3-Lyticase 的反应机理还包括空间选择性和反应温和性。荧光染料通过共价结合附着在表面残基,不干扰酶活性中心及底物结合口袋,确保催化功能和底物特异性。温和缓冲体系和低温条件防止酶的非特异性变性或聚集,同时保持 Cy3 的荧光特性稳定。反应完成后,通过透析或凝胶过滤去除未反应的自由染料,可获得高纯度、分散均匀、催化活性稳定的 Cy3-Lyticase。
此外,Cy3-Lyticase 可用于细胞壁结构分析和荧光示踪实验。其荧光信号强烈且可在显微镜下直接观察,结合酵母或真菌细胞,研究者可以实时监测细胞壁降解过程、酶分布和结合动力学,分析细胞壁组成、厚度及降解效率。Cy3-Lyticase 还可用于药物或载体递送实验,通过追踪酶分布评估微粒或纳米载体在细胞壁或细胞外基质中的作用。
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产品名称:CY3-Lyticase
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
厂家:良林生物

产品目录
DMPE-CY5 CY5标记二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱
DMPE-CY5.5 CY5.5标记二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱
DMPE-CY7 CY7标记二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱
DMPE-CY7.5 CY7.5标记二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱
仅用于科研,不能用于人体。小编axc