CY3-Fetoprotein，CY3标记胎蛋白的化学反应原理

CY3-Fetoprotein，CY3标记胎蛋白的化学反应原理

Cy3-标记胎蛋白（Cy3-Fetoprotein, Cy3-AFP） 是通过将荧光染料 Cy3 与胎蛋白（Alpha-Fetoprotein, AFP）分子进行共价结合形成的荧光复合物，用于蛋白追踪、细胞摄取分析、组织分布研究及生物成像。胎蛋白是一种分子量约 70 kDa 的糖蛋白，主要由单链多肽折叠形成多个 α 螺旋和 β 折叠结构域，并在 N 端或 C 端修饰有糖基。AFP 表面含有丰富的赖氨酸、半胱氨酸和羟基氨基酸残基，为 Cy3 的共价标记提供理想的化学反应位点。Cy3-AFP 结合了胎蛋白的生物学特性和 Cy3 的荧光信号，实现蛋白在体外或体内体系中的可视化追踪和定量分析。

化学反应原理上，Cy3-AFP 的构建基于 Cy3 荧光染料的活性官能团与 AFP 分子表面可反应残基的共价结合。常用标记方法包括 Cy3-NHS 酯与 AFP 表面赖氨酸 ε-氨基的亲核加成反应，以及 Cy3-maleimide 与 AFP 半胱氨酸巯基的 Michael 加成反应。NHS 酯基团在中性或弱碱性缓冲液（pH 7–8）中与蛋白氨基发生反应，生成稳定的酰胺键；maleimide 基团可与蛋白表面自由巯基反应形成稳定的硫醚键。这些共价键能够保证标记产物在水溶体系和生物体系中长期稳定，同时保持 AFP 的折叠结构和功能活性。

在标记过程中，反应选择性和温和性是核心原则。标记通常发生在蛋白表面远离糖结合位点、受体结合区域或折叠核心的残基上，以避免破坏 AFP 的结构完整性和生物功能。温和的缓冲体系和低温条件（通常 4–25℃）可防止蛋白聚集或变性，同时避免 Cy3 荧光淬灭。通过调节 Cy3 与 AFP 的摩尔比、反应时间和温度，可控制标记密度，实现荧光强度与蛋白活性的平衡。

反应结束后，通常通过透析、凝胶过滤或超滤去除未反应的自由染料，获得高纯度 Cy3-AFP。标记后的产物水溶性良好、分子分散均匀、荧光信号稳定，可直接用于共聚焦显微镜、流式细胞仪或荧光光谱检测。Cy3-AFP 的荧光信号（吸收波长约 540–550 nm，发射波长约 560–570 nm）可用于蛋白分布、摄取动力学及组织定位的定量分析。

反应机理的核心特征包括：1）共价结合的化学稳定性，使荧光染料不会在实验中脱落；2）选择性标记表面残基，保持蛋白的活性和折叠结构；3）温和可控反应条件，避免蛋白变性、聚集和功能丧失；4）标记密度可调节，实现荧光信号强度与蛋白功能的兼顾。通过这些化学原理，Cy3-AFP 不仅在体外实验中可用于蛋白追踪和相互作用研究，也适用于体内成像、药物递送示踪和组织分布分析。

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产品名称：CY3-Fetoprotein

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

厂家：良林生物

产品目录

FD-1080-MAL

FD-1080-MeTetrazine

FD-1080-NH2

FD-1080-NHS ester

FD-1080-TCO

FITC-，20S，-Protopanaxatriol 荧光素标记20，S，-原人参三醇

仅用于科研，不能用于人体。小编axc