Cy3-labeled，CY3标记铜蓝蛋白的反应条件

Cy3-labeled，CY3标记铜蓝蛋白的反应条件

Cy3-标记铜蓝蛋白（Cy3-Labeled Ceruloplasmin/Cu Blue Protein） 是通过将荧光染料 Cy3 共价结合到铜蓝蛋白（Cu Blue Protein, CBP）分子上形成的荧光复合物，用于蛋白追踪、分子成像、电子转移研究及生物化学实验。铜蓝蛋白是一类含有多铜中心的氧化还原蛋白，分子量一般在 30–70 kDa 范围内，由多个 α 螺旋和 β 折叠片段组成，其活性依赖于铜离子在蛋白中的特定配位环境。蛋白表面富含赖氨酸、半胱氨酸及羟基氨基酸残基，为 Cy3 的共价标记提供理想化学位点，同时标记需避免干扰铜中心的活性和蛋白折叠结构。Cy3-CBP 结合了蛋白的电子转移功能与 Cy3 的荧光特性，可在体外和体内体系中实现可视化追踪和动力学分析。

反应条件是确保 Cy3-CBP 成功合成并保持功能活性的关键因素。标记通常采用 Cy3-NHS 酯或 Cy3-maleimide。NHS 酯通过与蛋白表面赖氨酸 ε-氨基反应生成稳定的酰胺键，maleimide 通过与半胱氨酸巯基反应形成硫醚键。反应一般在温和缓冲体系（pH 7–8）中进行，以保持蛋白结构稳定和铜离子配位环境完整。温度控制在 4–25℃，避光操作可防止 Cy3 荧光淬灭或氧化损伤。反应时间通常为 1–4 小时，根据蛋白浓度和染料摩尔比可调节标记密度，兼顾荧光信号和蛋白功能。

在标记过程中，需要特别注意铜离子环境的保护。铜蓝蛋白的活性依赖于铜中心的几何构型和电子状态，因此缓冲体系中常加入适量螯合剂或抗氧化剂以防铜离子氧化或还原失活。同时避免极端 pH 和高温条件，以防蛋白变性、聚集或失活。标记位点通常选择在蛋白表面远离铜中心的区域，以保证荧光标记不会干扰电子转移功能。

反应完成后，通常通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱（HPLC）去除未反应的 Cy3 和小分子杂质，获得水溶性良好、分子分散均匀的 Cy3-CBP。产物可通过荧光光谱、紫外-可见吸收、质谱及 SDS-PAGE 等方法进行表征，确认标记成功、纯度和结构完整性。荧光光谱可检测 Cy3 的吸收（约 540–550 nm）和发射（约 560–570 nm）波长，以保证标记的荧光性能。

Cy3-CBP 的反应条件优化确保其在生物和化学研究中的可用性。标记后的产物水溶性良好、分散均匀，荧光信号稳定，可用于共聚焦显微镜、流式细胞仪和光谱分析。其荧光可用于蛋白分布追踪、细胞摄取分析和组织定位，也可用于研究电子转移机制及蛋白-蛋白相互作用。通过调节标记密度和反应条件，可实现荧光强度与蛋白活性的平衡，为后续实验提供可靠工具。

良林生物供应磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、磁性纳米颗粒、纳米金、近红外荧光染料、荧光量子点、碳纳米管、石墨烯及多种功能高分子材料。如有需求可咨询

产品名称：Cy3-labeled

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

厂家：良林生物

产品目录

FITC-ConA 荧光素标记刀豆球蛋白A

FITC-Cortistatin-14 荧光素标记神经肽Cortistatin-14

FITC-CSTSMLKAC 荧光素标标记心肌靶向肽CSTSMLKAC

FITC-CTP 荧光素标记穿膜肽CTP

FITC-Curcumin 荧光素姜黄素

仅用于科研，不能用于人体。小编axc