CY3-Ferredoxin，CY3标记铁氧还蛋白的结构合成

CY3-Ferredoxin，CY3标记铁氧还蛋白的结构合成

Cy3-标记铁氧还蛋白（Cy3-Ferredoxin, Cy3-Fd） 是通过将荧光染料 Cy3 共价结合到铁氧还蛋白（Ferredoxin, Fd）分子上形成的荧光复合物，用于蛋白追踪、光合作用研究、电子转移分析及生物成像。铁氧还蛋白是一类小型铁硫蛋白，分子量一般为 10–15 kDa，由单链多肽折叠形成紧密的三级结构，含有 [2Fe-2S] 或 [4Fe-4S] 铁硫簇作为电子传递中心。Fd 的结构高度保守，含有 α 螺旋和 β 折叠片段，表面暴露有赖氨酸、半胱氨酸等可反应的氨基酸残基，为 Cy3 的共价标记提供位点。Cy3-Fd 结合了铁氧还蛋白的电子转移功能与 Cy3 的荧光特性，可在体外和体内体系中实现可视化追踪及动力学分析。

结构合成上，Cy3-Fd 的构建基于蛋白化学修饰和荧光标记相结合的策略。首先，铁氧还蛋白的三级结构保持是关键，因此标记需在温和条件下进行，避免破坏铁硫簇和蛋白折叠。Cy3 标记通常采用 Cy3-NHS 酯或 Cy3-maleimide。NHS 酯可与 Fd 表面赖氨酸 ε-氨基发生亲核加成反应生成稳定酰胺键，而 maleimide 可与半胱氨酸巯基发生 Michael 加成形成硫醚键。在标记前，通常会保护铁硫簇不被氧化，使用低温、避光和惰性气氛进行反应，以确保蛋白功能和荧光染料稳定性。

标记反应通常在 pH 7–8 的缓冲体系中进行，温和条件下反应 1–4 小时，以保证标记位点选择在表面非功能区，避免影响铁硫簇的电子转移活性和蛋白折叠。通过调节 Cy3 与 Fd 的摩尔比，可实现标记密度可控，使荧光信号强度与蛋白活性达到平衡。标记完成后，产物需通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱（HPLC）去除未结合的 Cy3 和小分子杂质，获得水溶性良好、分子分散均匀的高纯度 Cy3-Fd。

结构特性方面，Cy3-Fd 保持了铁氧还蛋白的紧密折叠结构和铁硫簇活性，同时表面共价结合的 Cy3 荧光染料提供强烈、稳定的荧光信号。荧光标记位点选择在远离铁硫簇和电子转移中心的表面残基，以保证蛋白折叠和功能完整。标记后的 Cy3-Fd 可在缓冲液、培养基或其他水溶体系中均匀分散，避免聚集或沉淀，荧光信号稳定，可用于共聚焦显微镜、流式细胞仪及光谱分析。

在应用研究中，Cy3-Fd 可用于光合作用体系和电子转移研究，通过荧光追踪蛋白在体外或细胞内的分布、定位和相互作用。其荧光信号可用于定量分析蛋白的结合动力学、电子转移效率及复合物形成过程。Cy3-Fd 还可用于药物载体或纳米材料示踪，评估蛋白在递送体系中的稳定性和释放行为。此外，由于标记条件温和，Cy3-Fd 具有良好的生物相容性和功能保持能力，可在体外和体内实验中重复使用。

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产品名称：CY3-Ferredoxin

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

厂家：良林生物

产品目录

FITC-Chitosan 荧光素壳聚糖

FITC-Cholesterol 荧光素胆固醇

FITC-CKAAKN 荧光素标标记CKAAKN多肽

FITC-Colivelin 荧光素标记神经肽Colivelin

仅用于科研，不能用于人体。小编axc