Cy3-trichosanthin，CY3标记天花粉蛋白的合成过程研究

Cy3-trichosanthin，CY3标记天花粉蛋白的合成过程研究

Cy3-标记天花粉蛋白（Cy3-Trichosanthin, Cy3-TCS） 是将荧光染料 Cy3 共价结合到天花粉蛋白（Trichosanthin, TCS）分子上形成的荧光复合物，用于蛋白追踪、细胞摄取、分子相互作用分析及生物成像。天花粉蛋白是一种来源于天花粉（Trichosanthes kirilowii）种子提取的单链蛋白，分子量约 27 kDa，由约 247 个氨基酸残基组成，具有稳定的二级结构和折叠的三维构象。TCS 具有丰富的赖氨酸、半胱氨酸和羟基氨基酸残基，为 Cy3 的共价标记提供理想化学位点，同时其疏水性核心和活性位点使标记需选择表面残基以保证蛋白活性不受破坏。Cy3-TCS 结合了天花粉蛋白的生物活性与 Cy3 的荧光信号，可在体外或体内体系中实现可视化追踪和功能研究。

合成过程研究主要涉及四个关键环节：第一步为天花粉蛋白的预处理。TCS 通常溶解于中性或弱碱缓冲体系（pH 7–8），确保蛋白折叠完整并暴露表面赖氨酸或半胱氨酸残基。预处理可包括轻度还原半胱氨酸巯基以提高标记效率，但需避免过度破坏二硫键或蛋白结构。第二步为 Cy3 荧光染料活化。常用 Cy3-NHS 酯可与蛋白赖氨酸氨基反应，或 Cy3-maleimide 可与半胱氨酸巯基反应形成稳定共价键。在此过程中，需精确控制 Cy3 与 TCS 的摩尔比，以保证荧光强度和蛋白活性之间的平衡。

第三步为共价结合反应。活化后的 Cy3 与 TCS 混合，在温和缓冲液中进行反应，通常在低温避光条件下 1–4 小时，以防蛋白变性或荧光淬灭。该步骤的关键在于标记位点选择：荧光染料应结合在表面非活性区域，以避免干扰 TCS 的结构稳定性或分子功能。通过调控反应时间、温度和染料比例，可实现标记密度可控，兼顾荧光信号强度和蛋白活性。

第四步为产物纯化。反应完成后，混合体系中存在未结合的 Cy3、缓冲盐和低分子杂质。纯化通常采用透析、凝胶过滤或高效液相色谱（HPLC）去除游离染料，获得高纯度 Cy3-TCS。纯化后的产物水溶性良好、分子分散均匀，并保持蛋白折叠结构和功能活性，适用于荧光分析或生物实验。

在合成过程研究中，通常需要关注以下几个方面：1）反应条件的优化，包括 pH、温度、反应时间及摩尔比，以保证标记效率和蛋白活性；2）标记位点的选择，确保荧光染料不干扰 TCS 活性区域；3）纯化方法的选择，确保产物水溶性、分散性和荧光稳定性；4）标记产物的表征，包括荧光光谱、UV-Vis 吸收、质谱及 SDS-PAGE 分析，验证标记成功、纯度及分子完整性。

Cy3-TCS 的合成过程研究不仅有助于获得高纯度、功能完整的荧光标记蛋白，也为下游应用提供基础支持。在生物实验中，Cy3-TCS 可用于细胞摄取和运输研究，追踪蛋白在细胞内定位和代谢路径；可用于分子相互作用分析，观察 TCS 与受体、糖链或其他蛋白的结合行为；还可用于药物递送体系示踪，评估纳米载体或微粒对蛋白负载和释放的效果。荧光信号稳定、可控的 Cy3-TCS 可在体外和体内体系中实现高分辨率成像和定量分析。

良林生物供应磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、磁性纳米颗粒、纳米金、近红外荧光染料、荧光量子点、碳纳米管、石墨烯及多种功能高分子材料。如有需求可咨询

产品名称：Cy3-trichosanthin

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

厂家：良林生物

产品目录

FITC-BSA 荧光素标记牛血清白蛋白

FITC-c，RGDyK， 荧光素标记环肽c，RGDyK，

FITC-Calycosin 荧光素标记毛蕊异黄酮

FITC-CAP-18 荧光素标记抗菌肽CAP-18

FITC-CAQK 荧光素标标记CAQK多肽

FITC-Cephaeline 荧光素标记吐根酚碱

仅用于科研，不能用于人体。小编axc