CY3-Glycoprotein,CY3标记糖蛋白的合成步骤概述
CY3-Glycoprotein,CY3标记糖蛋白的合成步骤概述
Cy3-标记糖蛋白(Cy3-Glycoprotein) 是将荧光染料 Cy3 共价结合到糖蛋白分子上形成的荧光复合物,用于蛋白追踪、细胞摄取、分子相互作用研究及生物成像。糖蛋白是一类在蛋白质主链上共价连接有寡糖或多糖链的蛋白,分子量和糖基修饰类型多样,广泛存在于细胞膜、分泌液及血浆中。糖蛋白的多肽骨架含有赖氨酸、半胱氨酸等反应性氨基酸残基,而糖基的羟基和羧基提供额外化学修饰位点,为 Cy3 荧光标记提供了多样化的选择。通过 Cy3 标记,糖蛋白可在水溶体系或细胞环境中实现可视化和定量分析,同时保持结构完整性和生物功能。
合成步骤概述包括四个主要环节:第一步为糖蛋白的预处理。根据标记方法不同,需调节糖蛋白溶液的缓冲体系(通常 pH 7–8)以保持蛋白折叠稳定,同时暴露表面赖氨酸或半胱氨酸残基。若选择通过糖基羟基进行标记,则需先氧化糖基形成醛基以提供反应位点。第二步为荧光染料活化。常用 Cy3-NHS 酯或 Cy3-maleimide 分子,前者通过酯化反应可与蛋白赖氨酸氨基结合,后者通过 Michael 加成与半胱氨酸巯基结合。在此步骤中,需要控制染料与蛋白摩尔比,以保证标记密度和蛋白功能的平衡。第三步为共价结合反应。将活化后的 Cy3 与糖蛋白混合,在温和缓冲液中进行反应,通常在低温避光条件下 1–4 小时,以最大限度保持蛋白结构和活性,同时形成稳定的酰胺键或硫醚键。第四步为产物纯化与处理。反应结束后,通过透析、凝胶过滤或超滤去除游离 Cy3 和低分子杂质,获得高纯度 Cy3-Glycoprotein。纯化后的产物通常水溶性良好、分子分散均匀,可直接用于荧光分析或细胞实验。
整个标记过程中,需要注意的关键点包括:选择标记位点以避免干扰糖蛋白的活性或受体结合功能;控制反应温度和 pH 以防蛋白变性或聚集;通过调控 Cy3 与蛋白的摩尔比来实现荧光信号强度与蛋白活性的平衡。此外,标记后糖蛋白的糖链结构通常保持完整,确保生物识别功能不受影响。
Cy3-Glycoprotein 的合成使其在多种实验应用中具有优势。其荧光信号可用于蛋白的细胞摄取和运输分析,观察糖蛋白在细胞膜或胞内的定位与分布;可用于分析蛋白-蛋白或蛋白-糖复合物的相互作用;还可作为药物递送体系的示踪分子,监测载体内蛋白的分布和释放动力学。荧光标记与糖蛋白的天然水溶性和生物相容性结合,使其在体外和体内实验中均具有稳定性和可靠性。
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产品名称:Cy3-标记糖蛋白(Cy3-Glycoprotein)
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
厂家:良林生物

产品目录
FITC-Apelin-36,rat, mouse, 荧光素标记爱帕琳肽
FITC-ATF 荧光素标记磷酸化抗原多肽
FITC-Baicalein 荧光素标记黄芩素
FITC-Bilirubin 荧光素修饰胆红素
FITC-Biotin 荧光素生物素
仅用于科研,不能用于人体。小编axc