Alexa Fluor 555 azide,AF555叠氮的结构与化学特性
产品名称:Alexa Fluor 555 azide,AF555叠氮的结构与化学特性
Alexa Fluor 555 azide(AF555叠氮)是一种基于Alexa Fluor 555染料的叠氮化物衍生物,结合了Alexa Fluor系列的高荧光性能与叠氮基团的生物正交反应特性,广泛应用于生物标记、成像及分子互作研究。以下是其核心特性与应用详解:
1. 结构与化学特性
分子结构:以花青素类染料为核心,共轭苯基-吡咯体系赋予强荧光性能,末端引入叠氮基(-N₃),分子量约928-1043(不同供应商略有差异),分子式如C₃₈H₄₉K₃N₆O₁₃S₄或C₂₄H₄₈Cl₄N₈O₁₀。
溶解性:可溶于水、DMSO、DMF等溶剂,适配水相反应体系。
反应特性:通过铜催化(CuAAC)或无铜(SPAAC)点击化学与炔基(如DBCO、BCN)或环辛炔分子反应,形成稳定三唑环,实现特异性共价标记;无铜反应条件温和,适合活细胞标记。
2. 荧光特性
光谱参数:激发波长约555 nm,发射波长约565-570 nm,呈橙红色荧光,兼容TRITC/Cy3滤光片。
性能优势:高荧光亮度、强光稳定性(适合长时间成像),pH不敏感(pH 4-10),低非特异性结合,减少背景干扰,适用于多色实验(如与Alexa Fluor 488、Cy5联用)。
3. 核心应用场景
生物成像:
细胞/组织标记:活细胞/固定细胞的表面或内部标记,用于共聚焦显微镜、流式细胞术、荧光原位杂交(FISH)、Western blot及ELISA。
动态追踪:标记炔基修饰的代谢前体(如糖代谢探针),追踪细胞内代谢动态;结合生物素化抗体或配体,实现目标分子定位。
分子标记:通过点击化学与蛋白质、核酸、糖类等生物分子共价结合,构建荧光探针,用于分子互作、高通量成像及超分辨率技术(如STORM/PALM)。
多色实验:与绿色(Alexa Fluor 488)、远红色(Cy5)等染料联用,实现多通道成像及共定位分析。
4. 合成与操作
标记方法:通过NHS酯与蛋白赖氨酸氨基反应偶联,或直接与炔基分子进行点击化学标记。
纯化:透析、凝胶过滤或柱层析去除游离染料,提高标记特异性。
储存与稳定性:-20℃避光干燥保存,避免反复冻融;溶液可添加0.02%叠氮化钠防腐,防止微生物污染。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

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