CY3-Protamine-sulfate,CY3 标记的硫酸鱼精蛋白的合成步骤
CY3-Protamine-sulfate,CY3 标记的硫酸鱼精蛋白的合成步骤
CY3-Protamine-sulfate(中文名称:CY3 标记的硫酸鱼精蛋白)是一种通过将荧光染料 CY3 共价偶联到硫酸鱼精蛋白(Protamine sulfate)形成的功能性分子,用于生物成像、核酸递送、细胞示踪及生物分子示踪研究。硫酸鱼精蛋白是一类低分子量、高阳离子密度的多胺蛋白,富含精氨酸残基,能够与核酸分子通过静电作用形成复合物,因此在基因递送、核酸保护和药物载体设计中具有重要作用。通过 CY3 荧光标记,该蛋白能够在可见光区发射红色荧光,实现对蛋白分布、核酸载体及细胞摄取的实时追踪。
CY3-Protamine-sulfate 的合成步骤主要包括三个关键环节:活化染料、蛋白质偶联和纯化。首先,选择适合的 CY3 荧光染料活性形式(通常为 NHS 酯或异硫氰酸酯),该形式能够与蛋白质中的伯氨基发生亲核取代反应。活化染料需在干燥、避光的条件下保存,以防止水解或光漂白,同时可溶于适宜的有机溶剂如 DMSO,以便后续与蛋白反应。
第二步为蛋白质偶联。在缓冲条件温和的体系下(pH 7.2–8.5 的磷酸盐缓冲液或碳酸盐缓冲液),将 CY3 活性染料缓慢加入到硫酸鱼精蛋白溶液中。硫酸鱼精蛋白富含精氨酸残基和少量赖氨酸残基,其中赖氨酸氨基为主要反应位点。CY3 活性末端的亲电中心被蛋白质伯氨基攻击,形成中间四面体过渡态,随后生成稳定的酰胺键,将 CY3 分子牢固偶联在蛋白质上。偶联过程通常在低温或室温下缓慢搅拌,以避免蛋白质变性或聚集,同时减少染料的自解或淬灭。
第三步为产物纯化与表征。偶联完成后,反应混合物中可能含有未反应的 CY3 染料、蛋白质聚集物及副产物,需要通过透析、凝胶过滤或离心滤器进行纯化,以获得高纯度的 CY3-Protamine-sulfate。纯化后的产物可通过紫外-可见光光谱、荧光光谱及 SDS-PAGE 等方法进行表征,确认荧光标记成功和蛋白质结构完整性。通过调整 CY3 与蛋白摩尔比,可控制标记密度,实现荧光强度和生物活性的平衡。
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产品名称:CY3-Protamine-sulfate
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
厂家:良林生物

产品目录
生物素-阿兹夫定,BIOTIN-阿兹夫定,
CY2-甜菜碱,CY2-Betaine
BIOTIN-氯化胆碱,生物素标记氯化胆碱,
CY5-槲皮素,CY5-Quercetin
FITC-槲皮素,FITC-Quercetin
仅用于科研,不能用于人体。小编axc