Fluorescein-tyramide，荧光染料标记酪胺的合成及纯化过程
Fluorescein-tyramide，荧光染料标记酪胺的合成及纯化过程
Fluorescein-Tyramide 是一种功能化试剂，将荧光染料 fluorescein 与酪胺（tyramide）通过共价键连接而成。其核心特点在于，酪胺部分可在过氧化物酶（HRP, Horseradish Peroxidase）催化下生成活性自由基，从而与酚类或蛋白质的酪氨酸残基共价偶联，而 fluorescein 则提供荧光信号。Fluorescein-Tyramide 常用于信号放大技术（TSA, Tyramide Signal Amplification）、荧光标记免疫组化（IHC）、荧光原位杂交（FISH）及分子探针构建等实验中，能够在微量靶标存在下显著增强检测灵敏度。
化学结构特点：
荧光团 fluorescein：提供黄色荧光信号，激发波长约 495 nm，发射波长约 520 nm，光稳定性良好。
酪胺结构：苯环上的氨基与酪氨酸残基可通过过氧化物酶催化形成自由基，实现高特异性共价偶联。
连接桥：fluorescein 与酪胺之间通常通过羧基-胺基偶联形成稳定酰胺键，保证分子在生物体系中的稳定性和功能性。
合成过程主要包括以下步骤：
荧光团活化
将 fluorescein 的羧基通过活化剂（如 NHS, N-hydroxysuccinimide）形成 fluorescein-NHS 酯，赋予其高反应活性，为后续与酪胺偶联提供反应位点。酪胺偶联
将 fluorescein-NHS 酯与酪胺（4-羟基苯乙胺）在适当有机溶剂和缓冲体系（如 DMF/TEA）中反应，通过酰胺键将荧光团共价连接到酪胺分子上。该反应需控制温度和 pH，以防荧光团降解或副反应产生。反应终止与粗提取
偶联反应完成后，通过加入酸性或缓冲溶液终止反应，并通过有机溶剂萃取去除未反应的 fluorescein-NHS 和其他小分子副产物，获得粗产物。纯化
粗产物通常采用高效液相色谱（HPLC）纯化，分离目标 Fluorescein-Tyramide 与副产物或未反应物。纯化条件需兼顾荧光团的光稳定性和化学稳定性。最终得到高纯度、干燥的 Fluorescein-Tyramide，可直接用于 HRP 催化的信号放大实验。
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产品名称：Fluorescein-Tyramide
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研
厂家：良林生物
产品目录
CY2标记布比卡因 CY2-Bupivacaina
CY2标记胆汁酸 CY2- Sodium cholate
CY2标记儿茶素 CY2-EGCG
CY2标记甘氨酸 CY2-Glycine
仅用于科研，不能用于人体。小编axc