荧光素异硫氰酸酯-丹参酸B,FITC-Salvianolic acid B的合成方法
产品名称:荧光素异硫氰酸酯-丹参酸B,FITC-Salvianolic acid B的合成方法
结构组成与特性
核心结构:由丹参酸B(Salvianolic acid B, Sal B)与荧光素异硫氰酸酯(FITC)共价偶联形成。丹参酸B分子式为C₃₆H₃₀O₁₆,分子量718.61,含多羟基/羧基结构;FITC通过异硫氰酸酯基团与丹参酸B的活性基团(羟基/羧基)发生亲核取代反应,形成硫脲键偶联物。
功能特性:
荧光特性:FITC赋予化合物绿色荧光(激发波长495nm,发射波长520nm),适用于荧光成像、分子追踪及药物分布研究。
生物活性:丹参酸B本身具有抗氧化、抗炎、抗凋亡、抗纤维化及心血管保护等作用,偶联后保留其生物骨架特性,同时增强可视化追踪能力。
稳定性:需避光、低温(-20℃)储存以防荧光衰减和化学降解;在缓冲液中分散性良好,但需避免极端pH、高温及强光环境。
合成方法
分步合成:
丹参酸B提取:从丹参(Salvia miltiorrhiza)根中通过溶剂提取、柱层析分离等工艺获取高纯度产物,需控制温度、pH以避免酚羟基氧化。
FITC标记反应:在碱性条件(pH 8.0-9.5)下,FITC的异硫氰酸酯基团与丹参酸B的羟基/羧基反应,或通过EDC/NHS活化羧基后偶联。反应后经透析、凝胶过滤纯化,去除未反应试剂和副产物。
关键控制点:反应条件温和(中性/弱碱性缓冲液),避免丹参酸B结构破坏;纯化步骤确保偶联物纯度(≥95%)与荧光活性。
挑战与限制
合成挑战:丹参酸B的多酚结构易氧化,需严格控制提取和反应条件;偶联反应需平衡标记效率与生物活性保留。
稳定性与生物相容性:荧光信号可能受环境因素(如pH、温度)影响;长期使用需评估免疫原性、代谢风险及潜在毒性。
临床转化障碍:规模化生产需解决成本、标准化及质量控制问题;临床前研究需全面评估安全性(如抗PEG抗体反应、器官特异性毒性)。
应用局限性:紫外/可见光穿透深度有限,深部组织成像需结合近红外策略;荧光信号可能受生物样本自发荧光干扰。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

关于我们:
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