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Tyramide Conjugates CF 532,CF532-酪胺偶联物的结构合成

2025-12-23 分享

Tyramide Conjugates CF 532,CF532-酪胺偶联物的结构合成

Tyramide Conjugates CF532 的中文名称通常为CF532-酪胺偶联物,也可称为CF532 荧光酪胺试剂。其中,CF532 是一种红色荧光染料,激发波长约为 530 nm,发射波长约为 555 nm,具有高量子产率和良好的光稳定性;Tyramide(酪胺)是一种芳香胺类衍生物,可在过氧化物酶(如 HRP)催化下生成反应性自由基,实现与蛋白质酪氨酸残基的共价偶联。CF532-Tyramide 结合了荧光信号和信号放大能力,广泛应用于免疫组化和高灵敏度荧光检测。

二、结构特点

  1. 荧光团结构
    CF532 的核心为共轭芳香族染料结构,通过扩展的 π-电子体系形成稳定的激发和发射特性。该染料具有高吸光系数和量子产率,可在多种荧光成像条件下提供明亮、稳定的红色荧光信号。

  2. 酪胺基团
    酪胺(Tyramide)结构包含芳香羟基和氨基,可在 HRP 或其他过氧化物酶催化下生成芳香自由基。自由基可以与蛋白质或多肽分子上的酪氨酸残基共价结合,实现靶向标记和信号放大。

  3. 空间延展性
    荧光染料通过柔性连接臂与酪胺偶联,使荧光团远离靶蛋白分子,减少对蛋白质功能和结构的干扰,同时提高标记效率和信号可及性。

三、合成路线

  1. 酪胺活化
    选择含游离氨基的酪胺作为反应底物,通过保护羟基(如苄氧基保护)或直接使用自由羟基,保证偶联反应的选择性。

  2. 荧光染料活化
    CF532 荧光染料通过羧基活化(如生成 NHS 酯)形成活性中间体 CF532-NHS,可与酪胺的氨基高效偶联。活化过程通常在干燥有机溶剂或缓冲体系中进行,保持温和条件以防染料降解。

  3. 偶联反应
    将 CF532-NHS 与酪胺在缓冲体系(pH 7–8)中混合,使活性羧基与酪胺氨基形成稳定酰胺键。反应温和,避免破坏酪胺羟基的自由基生成能力,同时保持荧光染料的光学性能。

  4. 去保护与纯化
    偶联完成后,若酪胺羟基受保护,需要通过化学或催化方法去保护基。随后使用高效液相色谱(HPLC)、凝胶过滤或透析进行纯化,去除未偶联的染料和副产物,获得纯化的 CF532-Tyramide。

  5. 储存与应用
    纯化产物可冻干储存或溶解于缓冲液中,避光低温保存。在免疫组化或荧光原位杂交实验中,可与 HRP 标记的抗体配合,实现高灵敏度信号检测和多通道成像。

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产品名称:Tyramide Conjugates CF 532

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

厂家:齐岳生物

Tyramide Conjugates CF 532

产品目录

CY3.5-聚乙二醇-二苯基环辛炔,Cyanine3.5-PEG-DBCO

CY5-聚乙二醇-脱硫生物素,Cyanine5-PEG-Desthiobiotin

CY2-聚乙二醇-活性酯,Cyanine2-PEG-NHS

CY2-聚乙二醇-氨基,Cyanine2-PEG-NH2

仅用于科研,不能用于人体。小编axc