Streptavidin,AF700 conjugate，Alexa Fluor 700 荧光染料偶联链霉亲和素的合成路线

Streptavidin,AF700 conjugate，Alexa Fluor 700 荧光染料偶联链霉亲和素的合成路线

Streptavidin, AF700 Conjugate 是由链霉亲和素（Streptavidin）与 Alexa Fluor 700 荧光染料通过共价偶联形成的复合物。链霉亲和素是一种四聚体蛋白，每个亚基含有生物素结合位点，可与生物素化分子形成高亲和力复合物。Alexa Fluor 700 是一种近红外荧光染料，激发波长约 702 nm，发射波长约 723 nm，偶联后提供稳定的近红外荧光信号，用于多通道检测和成像实验。

合成路线概述：

1. 荧光染料活化

• Alexa Fluor 700 通常以 NHS 酯（N-hydroxysuccinimide ester）形式提供。

• NHS 酯在有机溶剂或缓冲液（pH 7–8）中具有高反应活性，可与蛋白质的赖氨酸氨基（-NH₂）形成稳定酰胺键。

2. 蛋白质准备

• 链霉亲和素在缓冲液中溶解，常用缓冲体系为 PBS（磷酸盐缓冲液），pH 控制在 7–8，保证赖氨酸氨基暴露且蛋白质稳定。

• 通过适当稀释和除盐，去除干扰小分子，确保偶联效率。

3. 偶联反应

• 将 AF700 NHS 酯缓慢加入链霉亲和素溶液中，轻轻搅拌以保证均匀反应。

• 反应温和进行，通常在室温或轻微低温下反应 1–2 小时，避免高温导致蛋白质失活。

• 偶联过程中，NHS 酯与蛋白质赖氨酸氨基形成共价酰胺键，实现染料与蛋白质的稳定结合。

4. 纯化与去除副产物

• 反应完成后，通过透析、凝胶过滤或离心滤膜去除未反应的染料和副产物。

• 确保最终产物仅含偶联的 AF700-链霉亲和素复合物，避免自由染料影响实验结果。

5. 保存与稳定性

• 纯化后的偶联物在 PBS 或含少量蛋白稳定剂的缓冲液中保存，避光低温（4°C）可延长储存寿命。

• 偶联物稳定，荧光信号和生物素结合能力在多种实验条件下保持可靠。

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产品名称：Streptavidin,AF700 conjugate

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

厂家：良林生物

产品目录

CY3标记牛血清白蛋白

Cy3-BSA

CY3标记偶氮酪蛋白

CY3-Azo-Casein

CY3标记葡萄糖酸

CY3-Gluconicacid

仅用于科研，不能用于人体。小编axc