Streptavidin, AF680 conjugate，Alexa Fluor 680 荧光染料共价偶联链霉亲和素的合成步骤
Streptavidin, AF680 conjugate，Alexa Fluor 680 荧光染料共价偶联链霉亲和素的合成步骤
Streptavidin, AF680 Conjugate 是由链霉亲和素（Streptavidin）与 Alexa Fluor 680 荧光染料共价偶联形成的复合物。链霉亲和素是一种四聚体蛋白，每个亚基含有生物素结合位点，可高亲和力结合生物素化分子。Alexa Fluor 680 是一种近红外荧光染料，激发波长约 679 nm，发射波长约 702 nm，偶联后可提供稳定的红外荧光信号，适用于多通道检测和成像实验。
合成步骤：
蛋白质准备
链霉亲和素溶解于适宜缓冲液中（如 PBS，pH 7.2–8.0），保证赖氨酸氨基（-NH₂）暴露并可反应。
对蛋白质进行除盐或透析处理，去除小分子杂质，提高偶联效率。
染料准备
Alexa Fluor 680 通常以 NHS 酯形式提供，溶解在无水 DMSO 或缓冲液中以保持活性。
NHS 酯具有高反应性，可与蛋白质赖氨酸氨基形成稳定的酰胺键。
偶联反应
将 AF680 NHS 酯缓慢加入链霉亲和素溶液中，轻轻搅拌均匀。
在室温下或轻微低温下反应 1–2 小时，确保充分结合，同时避免蛋白质变性。
反应中，NHS 酯与赖氨酸氨基共价结合，生成稳定的荧光标记复合物。
纯化与去除多余染料
反应完成后，通过透析、凝胶过滤柱或离心滤膜去除未反应的自由染料及副产物。
确保最终产物为偶联的 AF680-链霉亲和素复合物，避免干扰后续实验。
产品保存
纯化后的偶联物可溶解于 PBS 或含蛋白稳定剂的缓冲液中保存。
避光、低温（4°C）保存可延长荧光信号和蛋白质活性稳定性。
偶联物稳定，荧光信号强度和生物素结合能力在多种实验条件下保持可靠。
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产品名称：Streptavidin, AF680 Conjugate
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研
厂家：良林生物
产品目录
CY3标记葡萄糖氧化酶
CY3-Glucoseoxidase
CY3标记琼脂
CY3-Agarose
CY3标记热休克蛋白27
仅用于科研，不能用于人体。小编axc