生物素PSMA,Biotin-PSMA的合成及纯化过程
生物素PSMA,Biotin-PSMA的合成及纯化过程
中文名称:生物素标记前列腺特异性膜抗原
(亦称:生物素-PSMA、Biotin-PSMA 偶联物)
英文名称:Biotin-PSMA
(Biotinylated Prostate-Specific Membrane Antigen)
合成及纯化过程:
Biotin-PSMA 是一种功能化分子,将生物素(Biotin)共价偶联到前列腺特异性膜抗原(PSMA)配体或抗体上,用于生物检测、靶向成像及药物递送体系研究。其设计结合了生物素的高亲和力与 PSMA 的靶向特性,使偶联物在链霉亲和素介导体系中具有特异性识别能力。
合成过程:
PSMA 配体或抗体准备
根据应用选择小分子配体或单克隆抗体形式的 PSMA。若为抗体,需在温和缓冲体系中保持蛋白结构和活性。若为小分子配体,通常包含可与生物素偶联的活性氨基或羧基官能团。生物素活化
生物素通常以 NHS 酯(Biotin-NHS)或其他活化形式存在,通过活化羧基可高效与氨基发生酰胺化反应。活化过程在有机溶剂或缓冲体系中进行(如 PBS,pH 7.2–7.5),保证生物素活性和偶联效率。偶联反应
将活化的生物素与 PSMA 分子混合,反应条件温和(室温或低温),在缓冲液中进行 1–4 小时。反应过程中,PSMA 的氨基攻击生物素 NHS 酯的碳酰碳,生成稳定的酰胺键,将生物素固定到分子上。偶联比例可通过摩尔比控制,以保证靶向能力和生物素数量均衡。反应终止与缓冲调整
偶联完成后,加入甘氨酸或 Tris 缓冲液封闭未反应的 NHS 酯,防止非特异性偶联。缓冲体系可调至中性或弱碱性,以保护蛋白质或小分子配体活性。
纯化过程:
透析或凝胶过滤
对抗体型 Biotin-PSMA,可通过透析或凝胶过滤去除未反应的生物素、低分子杂质及副产物,获得高纯度偶联物。高效液相色谱(HPLC)纯化
小分子配体偶联的 Biotin-PSMA 可采用反相 HPLC 纯化,通过梯度洗脱分离目标产物与副产物,收集纯化峰。纯度与结构验证
质谱(MS):确认偶联后的分子量与理论值一致。
紫外/可见光谱(UV/Vis):生物素特征吸收峰检测偶联效果。
SDS-PAGE 或 HPLC 分析:抗体型产物用于纯度评估和条带可视化。
应用优势
可通过链霉亲和素体系实现靶向检测与信号放大。
保持 PSMA 配体或抗体的靶向能力,同时提供可追踪的生物素标签。
适用于 ELISA、流式细胞术、免疫荧光及成像研究。
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纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
厂家:良林生物
产品目录
Cy5标记盐酸拓扑替康
Cy5-Topotecan-hydrochloride
Cy5标记药物rhCNB
Cy5-药物rhCNB
CY5标记伊维菌素
CY5-Ivermectin
CY5标记胰岛素
仅用于科研,不能用于人体。小编axc