Sulfo-Cy7.5-PSMA，水溶性 Cy7.5-PSMA，反应条件

Sulfo-Cy7.5-PSMA，水溶性 Cy7.5-PSMA，反应条件

中文名称：水溶性 Cy7.5 标记前列腺特异性膜抗原
（亦称：Sulfo-Cy7.5-PSMA、Sulfo-Cy7.5 偶联 PSMA）

英文名称：Sulfo-Cy7.5-PSMA
（Water-Soluble Cy7.5–Prostate-Specific Membrane Antigen Conjugate）

反应条件（约600字）：
Sulfo-Cy7.5-PSMA 是将水溶性近红外荧光染料 Sulfo-Cy7.5 与 PSMA（前列腺特异性膜抗原）偶联形成的功能化分子。Sulfo-Cy7.5 含有羧基或活性酯基团，可通过酰胺化或其他共价偶联方式与蛋白质、肽链或小分子配体的氨基反应，从而获得靶向荧光偶联物。该分子结合了 PSMA 靶向能力和 Cy7.5 近红外荧光特性，广泛应用于体外靶向检测和体内成像研究。

反应条件与步骤概述：

1. 缓冲体系选择

• 偶联反应通常在水溶液或水/有机混合溶液中进行。

• 推荐使用中性或弱碱性缓冲液（如 PBS pH 7.2–7.5 或碳酸盐缓冲 pH 8.0）以保持 PSMA 活性并促进 NHS 酯与氨基反应。

• 缓冲液中可加入低浓度表面活性剂（如 0.01% Tween-20）以减少蛋白质吸附和聚集。

2. 活性酯偶联

• Sulfo-Cy7.5 通常以 NHS 酯或 Sulfo-NHS 酯形式提供，活性酯在水相中与伯氨基反应形成稳定酰胺键。

• PSMA 配体或抗体的氨基在缓冲液中以游离形式存在，可与活性酯发生高效偶联。

• 偶联反应温和进行，一般室温反应 1–4 小时，避免高温或剧烈搅拌破坏蛋白结构。

3. 摩尔比与偶联效率

• Sulfo-Cy7.5 与 PSMA 的摩尔比可根据标记程度和靶向性能优化，一般在 2:1 至 5:1 范围内。

• 过高染料比例可能导致蛋白质溶解性下降或聚集，应根据实验需要调控。

4. 反应终止与杂质去除

• 偶联完成后，可加入甘氨酸或 Tris 缓冲封闭未反应的 NHS 酯，防止非特异性反应。

• 随后通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱（HPLC）去除游离染料和低分子杂质，获得纯净 Sulfo-Cy7.5-PSMA。

5. 条件注意事项

• 避光操作，防止近红外荧光染料光漂白。

• 低温储存（4℃短期或 −20℃长期）以保持荧光活性和 PSMA 结构完整。

• pH 过高或过低可能导致染料水解或蛋白质变性，应保持缓冲体系稳定。

应用优势

• 高水溶性，避免染料沉淀或蛋白质聚集。

• 近红外荧光适合体内成像，组织自发荧光背景低。

• 通过 PSMA 靶向实现前列腺癌细胞选择性标记和追踪。

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