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DOPE-PEG5k-Streptavidin的合成工艺与纯化策略

2026-01-08 分享

产品名称:DOPE-PEG5k-Streptavidin的合成工艺与纯化策略

一、结构特性与化学性质

核心模块功能

DOPE(二油酰磷脂酰乙醇胺):作为脂质体或脂质纳米颗粒的核心成分,提供疏水性载体结构,增强细胞膜融合能力,提升药物递送效率。

PEG5k(聚乙二醇链):赋予水溶性、生物相容性及长循环特性,减少非特异性蛋白吸附,延长体内半衰期;PEG链长(5kDa)平衡隐形效应与靶向配体暴露度。

Streptavidin(链霉亲和素):通过高亲和力(Kd≈10⁻¹⁴ M)结合生物素,实现靶向标记、药物偶联或生物分子检测;保留酶活性位点,确保与生物素化分子(如抗体、核酸)的高效偶联。

物理化学参数

溶解性:溶于DMF、DMSO等有机溶剂,水溶液中形成胶束或脂质体;PEG链赋予亲水性,DOPE提供疏水性,形成两亲性结构。

稳定性:干燥/低温(-20℃避光、充氮气)保存可稳定数月;水溶液中易受pH、温度及酶解影响,需严格避水操作。

二、合成工艺与纯化策略

核心合成路径

DOPE-PEG5k偶联:通过PEG链末端的活性基团(如NHS酯、马来酰亚胺)与DOPE的氨基反应,形成稳定酰胺键或硫醚键;反应需在pH 7.0-8.5、室温至37℃条件下进行,避免DOPE氧化或PEG链降解。

Streptavidin偶联:利用PEG链另一端的活性基团(如NHS酯)与Streptavidin的氨基反应,形成共价偶联;需控制反应比例(如1:1-2摩尔比),避免过度偶联导致蛋白质变性。

纯化技术:采用凝胶过滤色谱(GPC)分离目标分子量产物,反相HPLC梯度洗脱(乙腈/水+0.1%TFA)去除杂质,结合冻干技术提高稳定性。

结构验证

NMR/MS:¹H NMR确认DOPE的脂质信号(δ 0.8-2.5 ppm,脂肪酸链)、PEG亚甲基信号(δ 3.5-4.0 ppm)及Streptavidin的氨基信号;质谱验证分子量及取代率≥95%。

FTIR/GPC:检测PEG链的C-O-C伸缩振动(1100-1150 cm⁻¹)、Streptavidin的酰胺键特征峰(1650-1680 cm⁻¹),GPC分析分子量分布(PDI≤1.1)。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

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关于我们:

良林科研服务平台是西安瑞胜生物科技有限公司旗下的品牌,良林科研服务平台致力于服务全球研发工作者,公司配备了化合物合成、纯化、冻干、质量检测与分析等精密仪器,良好有完备的生产,研发,检测全生产线的能力。良林生物致力于为客户提供有机化合物定制合成及生产服务。 我公司生产销售科研级别的药物传递和药物纳米靶向方面的产品,公司目前经营的产品主要有合成磷脂,PEG衍生物,嵌段共聚物,纳米金,磁性纳米颗粒,介孔二氧化硅,活性荧光染料,荧光量子点,点击化学和大环配体等等。


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