AT 647琥珀酰亚胺酯 ATTO 647 NHS ester，ATTO647 SE，AT647 NHS的生物正交反应

产品名称：AT 647琥珀酰亚胺酯 ATTO 647 NHS ester，ATTO647 SE，AT647 NHS的生物正交反应

一、核心生物正交反应机制

1. NHS酯基团的传统共价标记

反应原理：ATTO 647 NHS ester通过其NHS酯基团与生物分子（如蛋白质、抗体、寡核苷酸）中的伯胺基团（-NH₂）发生酰胺化反应，形成稳定酰胺键，实现荧光标记。反应条件温和（pH 7.0-9.0，室温），无需催化剂，适合大多数生物实验体系。

优势：高特异性、低背景干扰，适用于蛋白质/抗体标记、流式细胞术、免疫组化等场景。

2. 四嗪基团的生物正交反应（需衍生化）

ATTO 647 Tetrazine衍生物：若ATTO 647染料结合四嗪基团（如ATTO 647 Tetrazine），则可通过逆电子需求Diels-Alder反应（IEDDA）与反式环辛烯（TCO）发生快速、高效的生物正交反应。该反应无需金属催化剂，在生理条件下（pH 7-8，37℃）即可完成，适合活细胞/体内标记。

反应特点：反应速度快（秒级），选择性高，可避免干扰生物分子天然功能，适用于活细胞成像、分子追踪、药物递送系统构建等。

二、生物正交反应适配场景

1. 蛋白质/抗体标记

传统标记：通过NHS酯与蛋白质赖氨酸残基的伯胺反应，实现荧光标记，用于Western blot、ELISA、免疫荧光等实验。

生物正交标记：结合TCO修饰的抗体或配体，通过四嗪-TCO反应实现特异性标记，适用于活细胞表面受体追踪、靶向药物递送等。

2. 核酸标记与探针开发

寡核苷酸标记：NHS酯可与氨基修饰的DNA/RNA探针偶联，用于荧光原位杂交（FISH）、基因表达监测。

生物正交探针：结合叠氮化物或炔烃修饰的核酸探针，通过点击化学（如CuAAC或SPAAC）实现多色标记与信号放大。

3. 活细胞与体内成像

活细胞成像：四嗪-TCO反应可在活细胞中实现快速、无毒标记，用于细胞器动态追踪、信号通路研究。

活体成像：近红外荧光（发射波长669nm）具有深层组织穿透能力，结合生物正交反应可实现肿瘤靶向成像、药物分布监测。

4. 多色与超分辨成像

多色标记：与AF488（绿色）、AF647（红色）等染料联用，通过荧光补偿减少光谱重叠，实现共定位分析与多靶标检测。

超分辨显微镜：ATTO 647的高光稳定性支持STED、SIM等超分辨技术，用于纳米级结构解析。

三、优势与局限性

优势

荧光特性：近红外发射（669nm），低背景干扰，高量子产率（>0.6），适合深层组织成像。

生物相容性：NHS酯反应条件温和，四嗪-TCO反应无需金属催化剂，减少细胞毒性。

多功能集成：可结合传统标记与生物正交反应，实现复杂实验设计（如多色标记、信号放大）。

局限性

储存与稳定性：NHS酯易水解，需-20℃避光保存；四嗪基团需避免高温/强光，防止降解。

反应条件限制：四嗪-TCO反应需严格控制pH与温度，避免副反应；NHS酯反应需避免还原剂（如DTT）干扰。

成本与可及性：合成工艺复杂，成本较高，可能限制大规模应用。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

良林科研服务平台是西安瑞胜生物科技有限公司旗下的品牌，良林科研服务平台致力于服务全球研发工作者，公司配备了化合物合成、纯化、冻干、质量检测与分析等精密仪器，良好有完备的生产，研发，检测全生产线的能力。良林生物致力于为客户提供有机化合物定制合成及生产服务。 我公司生产销售科研级别的药物传递和药物纳米靶向方面的产品，公司目前经营的产品主要有合成磷脂，PEG衍生物，嵌段共聚物，纳米金，磁性纳米颗粒，介孔二氧化硅，活性荧光染料，荧光量子点，点击化学和大环配体等等。

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