ATTO 465 Acid,1156537-96-0,AT 465 COOH,AT 465羧酸的潜在局限性
产品名称:ATTO 465 Acid,1156537-96-0,AT 465 COOH,AT 465羧酸的潜在局限性
1. 化学稳定性与储存要求
环境敏感性
对光、温度及pH高度敏感,需-20℃避光干燥保存,避免反复冻融或暴露于极端pH环境(如强酸/碱)。羧酸基团在特定条件下(如高浓度或复杂生物样本)可能发生非特异性反应,影响标记效率或导致背景信号升高。
溶解性与操作复杂性
溶解性有限,需依赖有机溶剂(如DMSO、DMF)辅助溶解,可能影响生物分子稳定性。操作中需避免频繁溶解和冻干,取用时需严格干燥,增加实验操作难度和潜在误差风险。
2. 生物相容性与毒性风险
细胞毒性潜在风险
虽无铜催化点击化学可降低金属毒性,但高浓度或不当处理仍可能对细胞产生毒性,影响细胞活性或功能。标记后可能干扰生物分子(如蛋白质、核酸)的天然功能,如酶活性、抗原结合能力或杂交效率,需通过预实验验证标记后的生物活性保留情况。
免疫原性与代谢稳定性
作为小分子荧光标记,ATTO 465 Acid本身免疫原性低,但标记后的生物分子(如抗体)可能引发免疫反应,需评估其在体内应用中的免疫相容性。代谢稳定性方面,在生理pH(2-11)范围内稳定,但极端条件(如强酸/碱)可能导致降解。
3. 合成与纯化挑战
合成复杂性与批次差异
合成需多步有机反应(如苯胺、芳酸衍生物反应),纯度要求高(≥95%),可能存在批次间差异,影响实验可重复性。合成过程中需控制反应条件以避免副产物生成,增加工艺难度和成本。
纯化与质量控制
需通过HPLC、质谱等技术严格验证纯度与分子量,确保无显著杂质峰。储存和运输需惰性气体(如氩气/氮气)保护,避免氧化或降解,增加质量控制和物流成本。
4. 应用场景限制
活细胞成像与动态追踪
蓝色荧光易受细胞自发荧光干扰,降低信噪比。在活细胞动态追踪中,需优化激发光强度和曝光时间,避免光毒性对细胞造成损伤。同时,需匹配细胞渗透性标记策略,确保染料有效进入细胞内。
多色与超分辨成像
在多色成像中,需与绿色、红色染料精确匹配激发/发射光谱,避免串扰。在超分辨显微镜(如STED、SIM)中,虽支持高分辨率成像,但需优化标记密度和信号放大策略,以平衡分辨率与信号强度。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

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