AF430 carboxylic acid,AF430 羧基的应用场景
产品名称:AF430 carboxylic acid,AF430 羧基的应用场景
化学结构与性质
基础结构:基于香豆素(coumarin)荧光团,通过特定取代基修饰优化光谱性能和水溶性。分子式通常为C₂₂H₂₃NF₃KO₇S(具体因供应商而异),分子量约500-700 Da。
羧基功能:末端羧基(-COOH)提供反应活性,可通过碳二亚胺(如EDC/NHS)活化,与氨基(-NH₂)形成酰胺键,实现与蛋白质、肽、核酸、纳米颗粒等生物分子的共价偶联。
光谱特性:
激发波长:约430 nm(紫外-可见光范围,近紫外光激发)。
发射波长:约540-552 nm(蓝绿色荧光),斯托克斯位移23-112 nm,适合搭配405 nm或紫外激光的荧光显微镜、流式细胞仪等设备。
亮度:高荧光量子产率,优于传统荧光素(如FITC),但弱于长波长Alexa Fluor染料(如AF647)。
稳定性:中性至弱碱性(pH 7-9)稳定,强酸/碱或长时间光照可能导致荧光团结构破坏;需避光、低温(-20℃)保存以防止光漂白。
应用场景
生物分子标记:
蛋白质/抗体标记:通过羧基活化后偶联抗体,用于免疫荧光染色、流式细胞术、Western blot等。
核酸探针:标记胺修饰的寡核苷酸或引物,用于荧光原位杂交(FISH)、PCR扩增或电泳检测。
细胞成像:标记细胞膜表面氨基,实现活细胞或固定细胞的膜结构成像;结合共聚焦显微镜观察细胞器分布或动态过程。
药物递送与追踪:
标记纳米颗粒(如脂质体、聚合物纳米粒)或药物载体,通过荧光信号追踪体内分布及靶向效率。
与酶(如HRP)或生物素-链霉亲和素系统结合,实现信号放大(如TSA技术)或多色标记。
多色成像与检测:
蓝绿色荧光可与红色/黄色染料(如PE、APC)组合,用于多色流式细胞术或共定位分析。
作为FRET供体,与黄绿色/红色受体配对,研究分子间相互作用或构象变化。
操作注意事项
活化与偶联:羧基需先转化为NHS酯或马来酰亚胺等活性形式,再与目标分子反应;反应需在pH 7-9条件下进行,避免强亲核试剂干扰。
纯化与储存:反应后需通过透析、凝胶过滤或HPLC去除未反应染料;母液需避光、低温保存,避免反复冻融。
生物兼容性:对细胞和组织毒性低,但需注意内源性生物素(如某些组织)可能引起背景干扰,需预先封闭。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

关于我们:
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