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AF 488 azide,1679326-36-3,Alexa Fluor488 叠氮的活化与偶联

2026-01-28 分享

产品名称:AF 488 azide,1679326-36-3,Alexa Fluor488 叠氮的活化与偶联

1. 化学结构与核心特性

分子结构:基于Alexa Fluor 488荧光母核(激发波长495 nm,发射波长519 nm,绿色荧光),通过连接臂引入叠氮基团,分子式通常为C₂₇H₂₆N₆O₁₀S₂(分子量约634.6 g/mol),水溶性良好,但需助溶剂优化溶解。

荧光性能:荧光量子产率高(约0.92),光稳定性强,在pH 4-10范围内荧光强度稳定,适合长时间成像;与FITC/GFP光谱兼容,可用FITC通道检测。

叠氮基团活性:-N₃可与炔基(如炔丙基、DBCO)发生点击化学反应,生成稳定三唑环,反应选择性高,生物相容性好。

2. 活化与偶联机制

铜催化点击反应(CuAAC):

原理:在Cu(I)催化剂(如CuSO₄/抗坏血酸钠、TBTA配体)作用下,叠氮与炔基发生环加成,形成1,4-三唑环。

条件:pH 7-9、室温、30-60分钟;需严格控制Cu²⁺浓度(避免细胞毒性),常用于蛋白质、核酸的体外标记。

无铜点击反应(SPAAC):

原理:与环辛炔(如DBCO、ADIBO)自发反应,无需催化剂,生理条件下快速进行(速率常数10³ M⁻¹s⁻¹),适合活细胞或体内标记。

优势:避免铜毒性,减少生物样本损伤,适用于活细胞成像、组织穿透性研究。

3. 偶联应用场景

生物分子标记:

蛋白质/抗体:通过点击反应偶联炔基修饰的抗体,用于免疫荧光、流式细胞术、Western blot;标记细胞表面受体或胞内蛋白,追踪动态分布。

核酸探针:标记炔基修饰的DNA/RNA探针,用于FISH、实时PCR、基因表达分析;结合EdU/BrdU实现细胞增殖标记。

多糖/脂质:标记代谢标记的糖类或脂质,研究细胞膜结构或糖代谢途径。

药物递送与追踪:

标记药物载体(如脂质体、纳米颗粒)或ADC(抗体-药物偶联物),通过荧光信号监控靶向递送效率及体内分布。

多色成像与检测:

与红色/黄色染料(如AF594、PE)组合,用于多色流式细胞术或共定位分析;作为FRET供体,与黄绿色/红色受体配对,研究分子相互作用。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

AF 488 azide,1679326-36-3,Alexa Fluor488 叠氮

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