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6-羧基四甲基罗丹明,91809-67-5,6-TAMRA的实验优化要点

2026-01-28 分享

产品名称:6-羧基四甲基罗丹明,91809-67-5,6-TAMRA的实验优化要点

1. 反应条件优化

活化与偶联:

羧基活化:通过EDC/NHS体系活化羧基,生成NHS酯活性中间体(反应条件:pH 7.2-8.5,室温/37℃,30分钟);NHS酯需干燥保存,避免水解。

氨基偶联:与蛋白质/抗体(如赖氨酸残基)、核酸(如氨基修饰引物)或纳米颗粒的氨基反应,形成稳定酰胺键;反应比例(染料:生物分子=1:5至1:20),室温避光反应1-2小时或4℃过夜。

无铜点击反应:与环辛炔(如DBCO、BCN)自发反应,适合活细胞标记(避免铜毒性);反应速率10²-10³ M⁻¹s⁻¹,生理条件下(37℃,pH 7.4)30分钟完成。

纯化与质量控制:

反应后通过透析、凝胶过滤层析或HPLC去除游离染料;UV-Vis光谱或质谱验证标记效率(纯度≥95%)。

荧光强度标准化(如ImageJ分析),确保批次间一致性。

2. 应用场景与参数适配

荧光特性:

激发波长546-555 nm,发射波长576-580 nm(橙红色荧光),适配Cy3通道(如流式细胞仪、共聚焦显微镜);斯托克斯位移25 nm,减少光谱重叠。

光稳定性良好(耐受30分钟强光照射),适合长时间成像(如活细胞动态追踪、超分辨显微镜dSTORM)。

多色实验:

与FITC(绿)、AF647(近红外)组合,实现多色标记(如共定位分析、FRET实验);避免与Cy3光谱重叠。

生物成像:

活细胞/固定细胞标记(如线粒体、细胞膜);结合FISH(荧光原位杂交)研究核酸分布;流式细胞术检测细胞表面受体表达。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

6-羧基四甲基罗丹明,91809-67-5,6-TAMRA

关于我们:

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