AF 647 COOH，2090339-69-6的反应条件

产品名称：AF 647 COOH，2090339-69-6的反应条件

一、详细反应条件

活化阶段：

试剂比例：EDC与NHS的摩尔比为染料羧基的2:1~3:1，确保羧基充分活化。

pH控制：最佳pH 4.5-6.0，此酸性环境促进羧基活化，避免水解或自聚。

反应条件：室温避光反应15-30分钟，全程需严格避光，防止荧光淬灭。

偶联阶段：

pH控制：最佳pH 7.0-8.5（如PBS或HEPES缓冲液），此中性环境利于酰胺键形成。

反应条件：室温避光反应30-60分钟，染料与目标分子摩尔比为8:1~25:1（根据目标分子伯胺数量调整）。

缓冲液选择：避免含游离胺类物质（如Tris、甘氨酸），防止竞争结合活化位点。

合成与纯化：

合成路径：AF647羧酸经EDC/NHS活化转化为NHS酯，反应在室温下进行8-12小时，严格控制染料羧酸:EDC:NHS=1:1.2:1.2的比例，避免多聚杂质。

纯化方法：通过反相HPLC（C18柱，流动相乙腈/水含0.1%三氟乙酸）纯化，纯度可达98%以上。

二、储存与操作规范

长期储存：-20℃以下避光、干燥、密封保存，加入硅胶干燥剂，避免反复冻融。固体状态有效期24个月，配液后小体积分装避光冻存，有效期1-2周。

操作注意事项：

全程避光操作，防止荧光淬灭；从冰箱取出后需室温回温30分钟再开盖。

避免与强还原剂（如DTT）接触，以防羧基还原；避免与含胺物质或高盐溶液接触。

NHS酯在水相中半衰期约2小时，需现配现用。

三、光学特性与优势

光谱参数：激发波长约650 nm，发射波长约668 nm，量子产率约0.35，光稳定性强（比传统Cy5高2倍），抗pH干扰（pH 4.0-10.0荧光强度稳定）。

生物应用优势：

近红外荧光特性（组织穿透深度1-1.5 cm），背景干扰小，适合深部组织成像、流式细胞术、共聚焦显微镜等。

水溶性良好，细胞毒性低（IC50 > 350 μM），适合活细胞/活体实验。

与生物素-链霉亲和素系统兼容，用于信号放大（如免疫检测、药物递送追踪）。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

良林科研服务平台是西安瑞胜生物科技有限公司旗下的品牌，良林科研服务平台致力于服务全球研发工作者，公司配备了化合物合成、纯化、冻干、质量检测与分析等精密仪器，良好有完备的生产，研发，检测全生产线的能力。良林生物致力于为客户提供有机化合物定制合成及生产服务。 我公司生产销售科研级别的药物传递和药物纳米靶向方面的产品，公司目前经营的产品主要有合成磷脂，PEG衍生物，嵌段共聚物，纳米金，磁性纳米颗粒，介孔二氧化硅，活性荧光染料，荧光量子点，点击化学和大环配体等等。

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