AF 647-叠氮，Alexa Fluor 647 azide的兼容性

产品名称：AF 647-叠氮，Alexa Fluor 647 azide的兼容性

一、化学兼容性

反应机制与条件

点击化学适配性：通过铜催化叠氮-炔烃环加成（CuAAC）或无铜应变促进炔烃环加成（SPAAC）与炔烃/环辛炔（如DBCO、BCN）反应，形成稳定三唑键。铜催化反应需控制Cu¹⁺浓度（通常≤1 mM）以减少毒性，无铜反应（如SPAAC）更适用于活细胞体系。

pH耐受性：在pH 4-10范围内稳定，叠氮基团在中性至弱碱性条件下不易水解，适合水相生物实验。

溶剂兼容性：可溶于DMSO、DMF等极性有机溶剂，水中溶解度有限（需助溶剂如乙醇或DMSO辅助），避免与强还原剂（如DTT）或含胺物质接触以防副反应。

化学稳定性

光稳定性：量子产率0.35，抗光漂白能力强，连续激发1小时荧光保留率＞75%，适合长时间成像。

热稳定性：-20℃避光保存可稳定2年以上，室温下易分解，需避免反复冻融。

二、生物兼容性

细胞毒性

无铜体系：SPAAC反应毒性低，适合活细胞标记（如细胞表面受体、代谢物追踪）。

铜催化体系：需优化Cu浓度（通常＜100 μM）和反应时间（＜1小时），避免细胞损伤。

生物分子标记

蛋白质：标记抗体、酶、细胞器（如线粒体、内质网），通过赖氨酸残基的伯胺或半胱氨酸的巯基实现特异性标记。

核酸：用于DNA/RNA探针、荧光原位杂交（FISH），结合炔烃化核酸实现高效标记。

糖类与脂类：标记糖蛋白、糖脂，研究细胞膜动态及糖代谢路径。

活体成像优势

近红外特性：激发波长650 nm，发射波长668 nm，组织穿透深度1-1.5 cm，背景干扰低，适合深部组织成像及活体动物模型。

三、实验条件兼容性

多色标记与共定位

通道兼容性：与AF488（绿）、AF555（红）、DAPI（蓝）等染料形成清晰通道分离，适合多色免疫荧光、流式细胞术及共定位分析。

光谱特性：发射波长668 nm，与常见荧光蛋白（如GFP）无重叠，避免串色干扰。

仪器适配性

显微镜技术：适用于共聚焦显微镜、STED超分辨率显微镜、双光子显微镜，支持长时间活细胞成像。

流式细胞术：兼容633 nm或647 nm激光器，信号强度高，背景噪声低。

储存与操作规范

储存条件：-20℃避光、干燥保存，分装小体积母液（如5-10 mM DMSO溶液），避免反复冻融。

操作要求：全程避光，干燥环境操作，防止叠氮基团水解；从冰箱取出后需室温回温30分钟再开盖。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

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