1679326-36-3,Alexa Fluor 488-azide的可控解离性
产品名称:1679326-36-3,Alexa Fluor 488-azide的可控解离性
关键影响因素与调控要点
连接臂设计:标准 AF488-N3 的 C6 烷基间隔臂无敏感位点,偶联后无可控解离性;需定制含还原 / 酸 / 光 / 酶敏感连接臂的衍生物,才能实现可控解离。
触发条件强度:还原触发中,TCEP 浓度<5 mM 或温度<40℃会导致解离不完全;酸催化中,pH>4.0 时解离速率显著降低,需平衡条件与生物样本耐受性。
三唑环稳定性:常规三唑环在生理条件下极稳定,无自发解离;仅在极端条件(如浓酸 + 高温)下才水解,因此 “非敏感连接臂 + 三唑环” 的复合物无实用可控解离性。
四、解离的特异性与副反应控制
特异性:解离仅针对连接臂 / 三唑环,不破坏 AF488 荧光团结构,解离后荧光保留率>90%,可用于解离前后的荧光对比。
副反应规避:TCEP 解离时避免与金属离子(如 Cu²+)共存,防止氧化副反应;酸催化时控制温度,避免蛋白质 / 核酸的变性;光触发时选择细胞耐受的紫外功率,减少细胞损伤。
五、应用场景与实操建议
生物样本脱标:用 TCEP 还原解离,适配蛋白质组学质谱分析,避免荧光基团干扰分子量检测。
靶向释放:在药物递送系统中引入酸敏感连接臂,肿瘤内吞体酸性环境触发 AF488 解离,实现 “标记 - 释放” 双功能。
实操要点:优先选择还原敏感连接臂的 AF488-N3 衍生物,TCEP 解离条件温和、效率高;常规 AF488-N3 偶联后,需通过化学修饰引入敏感位点,才能实现可控解离。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

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