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1644558-28-0;Sulfo-NHS-Diazirine的荧光效果

2026-02-05 分享

产品名称:1644558-28-0;Sulfo-NHS-Diazirine的荧光效果

一、核心特性:无自发荧光,适配荧光标记体系

分子结构含磺基 - NHS 活性酯与二氮杂环丙烷(Diazirine)光敏基团,无荧光发色团,自身不产生荧光信号,避免背景干扰,适合作为荧光标记的载体或交联桥接试剂。

水溶性强(磺基修饰),在生理条件下稳定,可与含氨基生物分子高效偶联,偶联后不影响标记物的荧光光谱,保证荧光检测准确性。

二、荧光标记原理:通过偶联 / 交联实现荧光信号呈现

第一步:NHS 活性酯与生物分子(如抗体、蛋白、多肽)的氨基发生酰胺化反应,实现分子偶联,若偶联物含荧光基团(如 FITC、Cy3、Cy5 等),则赋予标记体系荧光属性。

第二步:330-370 nm 长波紫外光激发二氮杂环丙烷,生成高活性卡宾中间体,与邻近生物分子发生交联,固定荧光标记的分子复合物,便于荧光成像或检测捕捉信号。

交联过程温和,不破坏荧光基团结构与荧光活性,确保荧光信号稳定可靠。

三、荧光效果的关键影响因素

标记物的荧光性能:所偶联荧光染料的激发 / 发射波长、消光系数、量子产率决定最终荧光亮度与检测灵敏度,如 Cy5 标记可实现近红外荧光成像,穿透性更强。

偶联效率:pH 7-9 条件下偶联效率最佳,过高或过低 pH 会降低 NHS 活性,影响标记密度,进而减弱荧光信号;反应体系中杂质会干扰偶联,需保证试剂纯度(≥95%)。

光交联条件:紫外光强度与照射时间需适配,过度照射可能导致荧光基团光漂白,降低荧光强度;适宜条件(如 365 nm、1-5 min)可保证交联效率,同时保护荧光信号。

环境因素:pH、离子强度、温度会影响标记物的构象,进而影响荧光量子产率,如部分荧光染料在酸性环境下荧光淬灭,需控制检测体系 pH 稳定。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

1644558-28-0;Sulfo-NHS-Diazirine

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