FITC-PEG-EPO的实验步骤
产品名称：FITC-PEG-EPO的实验步骤
一、实验总逻辑
FITC-PEG-EPO 有两个活性端：
FITC：荧光标记端（不参与偶联，只发光）
EPO：环氧基 → 与 -NH₂ / -SH 共价反应
常用反应：
EPO + -NH₂（蛋白 / 氨基材料） → 稳定 C‑N 键
二、试剂与体系
FITC-PEG-EPO
目标物：蛋白 / 抗体 / 氨基修饰材料（含 -NH₂）
缓冲液：
0.1 M NaHCO₃ pH 8.3（最推荐）
或 0.1 M PBS pH 7.4–8.0
避光操作
三、标准实验步骤（蛋白 / 抗体）
1. 溶液准备
将蛋白 / 抗体溶于 0.1 M NaHCO₃ pH 8.3
浓度：1–10 mg/mL 均可
FITC-PEG-EPO 用 DMSO 配成 10 mM 储存液
2. 摩尔比（关键）
FITC-PEG-EPO : 蛋白 = 5~10 : 1
（过量 PEG 试剂保证反应完全）
3. 反应条件
将 FITC-PEG-EPO DMSO 溶液逐滴加入蛋白溶液
轻轻混匀，避光
反应：
室温：2 h
或 4 ℃ 过夜（更温和）
环氧与氨基反应不需要催化剂、不需要活化剂。
4. 纯化去除未反应 PEG
方法 A：超滤离心（推荐）
10 kDa 超滤管
PBS 洗涤 3–4 次
最后浓缩收集
方法 B：凝胶过滤柱
如 Sephadex G‑25 / PD‑10
5. 鉴定
紫外：495 nm 吸收（FITC 特征峰）
荧光：激发 488 nm，发射 520 nm 左右
GPC / 电泳：分子量上移，证明 PEG 偶联成功
温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh
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