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BHQ-3 NHS，黑洞淬灭剂3-N-羟基琥珀酰亚胺酯，BHQ-3 NHS Ester

2026-05-12 分享

BHQ-3 NHS是将第三代黑洞淬灭剂BHQ-3修饰NHS活性酯的非荧光淬灭探针。BHQ-3的吸收光谱覆盖620-730nm，*大吸收波长约679nm，完美匹配Cy5、ATTO-647、Alexa Fluor 647等远红区荧光染料的发射光谱。外观为深黑色固体，分子量约700道尔顿，纯度≥90%。该化合物是FRET（荧光共振能量转移）和分子信标设计中*高效的暗淬灭剂之一。

暗淬灭的工作原理与传统荧光淬灭剂有本质区别。传统淬灭剂（如DABCYL、TAMRA）本身具有荧光，会产生背景信号干扰检测。而BHQ-3作为"暗淬灭剂"，其吸收的能量几乎全部以非辐射方式耗散为热能，不产生任何荧光背景。这一特性使BHQ-3 NHS标记的探针在未被切割或未发生构象变化时，背景信号趋近于零，信噪比*高——在qPCR探针检测中，使用BHQ-3的信噪比比TAMRA体系提高5-10倍。

NHS酯的偶联便利性使BHQ-3可高效标记氨基功能化的核酸探针、多肽和蛋白质。在寡核苷酸合成中，BHQ-3 NHS可在合成末端引入淬灭基团，用于构建TaqMan探针和分子信标。与氨基修饰的引物反应时，NHS酯在pH 8.5条件下与氨基生成稳定酰胺键，偶联效率可达98%以上。由于淬灭效率与距离的六次方成反比（R₀约为碱基对数），BHQ-3在分子信标设计中可将淬灭距离控制在5-15个碱基对范围内，实现*高的开关比。

在多重PCR检测中，BHQ-3 NHS标记的探针与FAM/HEX/ROX等荧光染料配合，可在同一反应管中同时检测多个靶标。BHQ-3的宽吸收光谱使其可同时淬灭Cy5和ATTO-647的荧光，减少探针设计的复杂性。此外，BHQ-3还被用于构建荧光互补实验（Fluorescence Complementation）中的淬灭对，研究蛋白质-蛋白质相互作用。

同类型推荐包括BHQ-1 NHS（吸收峰534nm，匹配FAM/TAMRA）、BHQ-2 NHS（吸收峰579nm，匹配TET/JOE）、BHQ-0 NHS（吸收峰480nm，匹配FAM）、BHQ-3 Maleimide（巯基偶联版）等，覆盖从蓝区到远红区的完整淬灭光谱。保存条件-20℃避光干燥，NHS酯易水解，务必在干燥环境下操作。

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