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ICG SE,ICG-NHS Ester,吲哚菁绿琥珀酰亚胺酯,ICG-Succinimidyl Ester

2026-06-05 分享

吲哚菁绿琥珀酰亚胺酯(ICG SE,CAS 1622335-40-3)是吲哚菁绿(ICG)经N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化后得到的活性酯衍生物,分子中含有高反应活性的NHS酯基团。该基团能在弱碱性条件下(pH 7.2-8.5)与伯胺基(-NH₂)发生高效酰胺化反应,释放NHS副产物,从而将ICG的近红外荧光共价连接到蛋白质、多肽或氨基修饰的材料表面。ICG SE的出现,解决了ICG本身反应活性低、难以直接偶联的技术瓶颈,成为近红外荧光标记领域使用最广泛的活化试剂之一。

从反应机理来看,NHS酯与伯胺的反应属于亲核酰基取代。蛋白质表面的赖氨酸ε-氨基和N端α-氨基均可作为亲核试剂进攻NHS酯的羰基碳,形成稳定的酰胺键。该反应在水性缓冲液中即可进行,反应速率常数约为10⁻²-10⁻¹ M⁻¹s⁻¹,远高于ICG直接与胺基反应的速率。正因如此,ICG SE被广泛用于抗体、酶、蛋白质纳米颗粒的荧光标记,标记效率通常可达80%以上。

在分析化学领域,ICG SE是构建近红外荧光免疫探针的关键原料。传统荧光染料如FITC、Cy5在复杂生物样本中存在严重的自发荧光干扰,而ICG的发射波长位于780-830nm的近红外窗口,背景噪声*低。利用ICG SE标记抗体后,所得探针可用于Western Blot的近红外检测、流式细胞术的多色分析以及微量板读数器的高通量筛选。特别是在双标记实验中,ICG SE与可见光范围的活性染料(如ICG SE与Cy5-NHS)可同时使用,实现多靶点同步检测。

在材料表面功能化方向,ICG SE被用于赋予高分子材料近红外荧光特性。例如,将ICG SE与氨基硅烷修饰的玻璃片反应,可制备近红外荧光基底,用于表面等离子体共振(SPR)与荧光成像的联用检测。在微流控芯片领域,ICG SE标记的抗体被固定在通道壁上,实现对目标分析物的在线荧光检测,灵敏度较紫外检测提升约10倍。

ICG SE的储存需特别注意:NHS酯基团对水敏感,遇水即水解失活。因此需在-20℃干燥避光条件下保存,使用前需回温至室温并在无水有机溶剂(如DMSO、DMF)中溶解。偶联反应完成后,需通过凝胶过滤或透析去除未反应的游离ICG SE,以降低背景荧光。

屏幕截图2026-03-19103759.jpg

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