Streptavidin-Alexa Fluor 647,Streptavidin-AF647,链霉亲和素-Alexa Fluor 647偶联物
Streptavidin-Alexa Fluor 647 Conjugate,常被简称为Streptavidin-AF647,是链霉亲和素与Alexa Fluor 647近红外荧光染料共价偶联得到的功能试剂,也是当前生物成像领域应用十分广泛的远红区荧光报告分子。Alexa Fluor 647的激发波长约650nm,发射波长约670nm,处于生物组织的“光学透明窗口”区间,这个波段的光线穿透能力强,生物样本的自发荧光几乎可以忽略不计,能有效避开可见光区荧光染料常见的背景干扰问题。
和传统的Cy5类近红外染料相比,Alexa Fluor 647的分子结构经过特殊修饰,拥有更强的抗光漂白能力和更高的荧光量子产率,即使在高强度的激光长时间照射下,也不会出现快速的荧光信号衰减。将它以优化的比例标记到链霉亲和素表面后,得到的偶联物在保留链霉亲和素对生物素超高亲和力的同时,还拥有了远红区稳定明亮的荧光信号,完美适配各类高灵敏度的生物检测场景。
在流式细胞术的多参数检测实验中,它是不可或缺的核心荧光探针。流式细胞仪的633nm激光线可以完美匹配Alexa Fluor 647的激发峰,激发效率远高于普通的Cy5染料,能输出*强的荧光信号。在多色流式的配色方案中,Streptavidin-Alexa Fluor 647通常被用来标记低丰度的细胞表面标志物,它的荧光信号亮度高、光谱重叠小,即使在同时使用4-5种不同荧光染料的复杂配色体系中,也能通过光谱补偿清晰区分出对应的阳性细胞群体,大幅提升稀有细胞亚群的检测准确率。
在单分子荧光示踪实验中,它的表现同样十分亮眼。近红外波段的特性让它几乎不会受到细胞内其他生物分子自发荧光的干扰,科研人员可以在宽场荧光显微镜下,长时间追踪单个标记了Streptavidin-Alexa Fluor 647的生物分子在活细胞内的运动轨迹,获得毫秒级的动态运动参数。这种技术被广泛应用于分子马达的运动机制、核酸蛋白复合物的组装动态等前沿基础研究中,帮助科研人员在单分子层面观测到传统群体平均实验无法发现的异质性行为,为解析生命活动的微观机制提供了关键的技术支撑。

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