Sulfo-Cy3-SE,磺化Cy3琥珀酰亚胺酯,CAS:146368-16-3的应用
Sulfo-Cy3-SE,磺化 Cy3 琥珀酰亚胺酯,CAS 号 146368-16-3,是带有琥珀酰亚胺活性酯基团的磺化三甲川花菁活性荧光染料,也是水相氨基标记体系中应用范围最广的活化型 Cy3 荧光探针。分子结构核心为双磺化吲哚三甲川发色骨架,吲哚环烷基侧链修饰磺酸基团赋予染料完全水溶特性,分子末端共价连接琥珀酰亚胺酯活性官能团,该活性基团可在温和中性水环境下特异性与各类分子表面伯氨基发生亲核取代反应,生成稳定酰胺键修饰产物,无需额外活化试剂辅助反应进行。
光谱性能上,该染料*大吸收波长 548nm,荧光发射峰 563nm,绿光荧光信号辨识度高,与 Cy5、Cy7 系列远红区染料光谱无重叠,支持多色荧光同步观测。与无磺化修饰的普通 Cy3-NHS 酯对比,Sulfo-Cy3-SE 无需添加有机助溶剂,纯水、PBS 缓冲液、HEPES 缓冲液均可快速完全溶解,溶解后溶液澄清透明,长期放置无染料聚集沉淀现象。该染料荧光量子产率约 0.27,分子内部磺酸基团形成电荷排斥效应,有效抑制染料分子间 π-π 堆叠聚集,避免聚集引发的荧光淬灭问题,即便染料浓度提升至 100μmol/L 依旧能维持稳定荧光强度。
提纯与质控工艺具备严苛标准,工业制备阶段先完成磺化 Cy3 羧酸中间体合成,再与 N - 羟基琥珀酰亚胺(NHS)在碳二亚胺催化下发生酯化反应生成活性酯粗品。粗品中含有未反应羧酸原料、水解失效的羟基琥珀酰亚胺副产物,需依次通过离子交换层析、反相高效液相色谱两级纯化,去除全部小分子杂质。纯化完成的成品经低温真空冻干得到橙红色粉末固体,通过高效液相色谱进行纯度检测,合格产品单体纯度需高于 95%,活性酯有效官能团含量不低于 90%。储存条件要求全程避光、-20℃低温密封保存,常温放置会加速琥珀酰亚胺酯水解失效,丧失氨基标记活性。
核心应用聚焦各类含氨基基质的共价荧光修饰,依托活性酯可直接水相标记蛋白、多肽、氨基修饰葡聚糖、氨基化二氧化硅纳米颗粒等材料。标记反应条件温和,pH7.0~8.5 中性缓冲环境下即可快速完成偶联,不会破坏基质本身的空间分子结构。标记后的荧光修饰产物稳定性强,酰胺共价键耐酸碱缓冲液洗脱,染料不易脱落。该染料大量用于凝胶荧光成像、液相色谱荧光检测、多孔纳米材料表面修饰、水凝胶荧光可视化改性等材料表征与高分子改性研究场景。

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