Rhodamine B‑Paeoniflorin，罗丹明B‑芍药苷，RB‑Paeoniflorin

Rhodamine B‑Paeoniflorin 罗丹明B‑芍药苷，补充别名RB‑Paeoniflorin、Tetramethylrhodamine‑Paeoniflorin、Rhodamine B‑PF，是以天然单萜糖苷芍药苷为母体分子，共价修饰罗丹明B荧光发色团得到小分子荧光探针。芍药苷是芍药属植物当中代表性次生代谢糖苷分子，分子结构包含复杂萜类母核与糖取代片段，拥有多组羟基官能位点，在天然产物化学、分子互作研究领域受到较多关注。天然芍药苷本身不具备荧光响应，很多体外分子识别实验无法直接追踪该分子的行为轨迹，通过化学偶联引入罗丹明B荧光基团，赋予母体分子可见光荧光信号。

化学修饰合成优先选择芍药苷分子侧链羟基进行活化偶联，尽可能保留萜类母核与糖苷片段原始空间构型，降低化学修饰对于母体分子空间构象干扰。反应结束后，利用制备色谱对粗产物分离提纯，除去未反应游离罗丹明染料以及未修饰芍药苷原料。该探针可溶于甲醇、乙醇以及甲醇‑水混合溶剂，纯水溶液溶解度中等，高浓度条件下容易出现染料聚集，发生荧光淬灭。储存条件需要避光冷冻保存，溶液状态现配现用，长时间存放易出现酯键水解，造成探针分子降解失效。

该探针主要面向体外天然产物分子互作研究，用来解析芍药苷母体分子和各类蛋白、凝集素之间结合作用。利用荧光偏振、荧光淬灭实验手段，加入靶标蛋白之后观测探针荧光偏振数值、荧光强度变化，以此评估二者结合亲和力、结合位点特征。同时可以借助荧光显微手段，在体外模拟体系观测该分子与固相载体、植物组织切片组分之间吸附结合行为，研究萜类糖苷分子的界面吸附特性。也用于筛选能够和芍药苷发生结合的大分子组分，开展天然产物的分子识别机制基础探究。

pH环境会影响罗丹明发色团荧光输出，缓冲体系pH需要维持弱酸性至中性区间，强碱环境会造成荧光基团信号大幅衰减。实验过程中需要设置空白对照组，扣除游离染料干扰信号，保证检测数据真实有效。该探针用于体外生化层面天然产物科学研究，用于揭示萜类糖苷分子和生物大分子之间相互作用模式。

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