Rhodamine B‑glucosylglycerol，罗丹明B‑甘油葡糖苷的合成工艺与应用

Rhodamine B‑glucosylglycerol 罗丹明B‑甘油葡糖苷，补充别名RB‑GG、Tetramethylrhodamine‑Glucosylglycerol、Rhodamine B‑2‑O‑α‑Glucosylglycerol，是以甘油葡糖苷为母核，共价偶联罗丹明B荧光基团得到小分子糖基衍生物荧光探针。甘油葡糖苷是广泛存在于藻类、部分微生物内的相容性溶质，分子结构由葡萄糖单元与甘油骨架糖苷键连接构成，分子同时带有多元羟基，极性*强，具备优秀水合能力，在渗透压调节、生物界面水合层研究领域具有很高科研价值。天然甘油葡糖苷分子不具备荧光属性，无法直接开展体外分子追踪检测，化学偶联荧光染料能够赋予该分子可见光荧光响应信号。

合成工艺选取甘油葡糖苷分子中非关键羟基位点进行活化修饰，*大程度保留原有糖苷键结构与甘油骨架，避免修饰破坏母体分子的极性水合特性。采用碳二亚胺类缩合试剂完成罗丹明B羧基与活化羟基之间偶联反应，反应结束后，利用反相制备色谱分离纯化产物，除去未反应游离染料以及未修饰甘油葡糖苷原料。该探针在纯水、水‑甲醇混合溶剂溶解性良好，非极性有机溶剂溶解度较差。光照条件下荧光基团易发生光漂白，固体状态避光低温储存稳定性更佳，溶液建议现配现用。

该探针主要用于体外相容性溶质科学研究，用来探究甘油葡糖苷这类相容性小分子和多糖、蛋白大分子之间水合相互作用。借助荧光光谱、荧光淬灭技术，检测探针在不同渗透压、盐浓度环境当中荧光信号变化，分析甘油葡糖苷分子对于大分子周围水合环境带来的影响。也可以用来研究凝集素蛋白对于甘油葡糖苷糖基片段识别能力，表征小分子糖衍生物与蛋白之间非共价结合作用。同时可用于固液界面实验，观测该类极性小分子在不同材料表面吸附行为。

体系pH对罗丹明荧光信号影响显著，中性、弱酸性缓冲环境更适合开展检测；高盐环境不会直接破坏探针分子，但会改变分子间相互作用，带来荧光强度偏移，实验需要设置对应的盐浓度空白对照，排除环境带来信号干扰。该探针用于体外生化体系，围绕相容性溶质的分子识别、界面水合行为开展基础探究工作。

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