DBCO-Maleimide,DBCO-马来酰亚胺,Dibenzocyclooctyne-Maleimide
DBCO-Maleimide(DBCO-马来酰亚胺),也可称Dibenzocyclooctyne-Maleimide、ADIBO-Maleimide,是一款将无铜点击反应活性与巯基特异性偶联能力深度结合的双功能交联试剂。它的分子结构一端带有高应变能的二苯并环辛炔基团,另一端连接高反应活性的马来酰亚胺位点,中间通过短链脂肪烃完成桥接,整体分子量小巧紧凑,不会对被修饰的蛋白、多肽分子的天然空间构象造成明显的空间位阻干扰。
在常规的生物偶联操作中,传统铜催化点击化学反应容易引入难以彻底去除的金属铜残留,对部分结构敏感的酶、抗体片段类样品造成不可逆的活性破坏,后续还需要额外增加复杂的除铜纯化步骤,大幅提升实验操作成本。而DBCO-Maleimide依托应变促进的环炔-叠氮环加成反应,完全无需铜离子等金属催化剂参与,就能在常温、中性水相环境中快速生成化学性质极其稳定的三唑环结构,反应副产物*少,几乎可以实现定量偶联。其马来酰亚胺端则能在pH 6.5-7.5的温和条件下,与多肽、蛋白中暴露的半胱氨酸残基上的巯基发生高度特异性的迈克尔加成,形成不可逆的硫醚键,偶联效率远高于传统的NHS酯类氨基随机修饰,能精准控制偶联位点,*大程度保留目标生物分子的原有活性。
在材料界面功能化场景中,该试剂可作为性能优异的中间偶联桥梁,先通过马来酰亚胺与预修饰在玻璃基底、磁性微球、透明水凝胶等材料表面的巯基硅烷发生定向反应,将DBCO活性位点均匀、高密度地固定在材料界面上,后续再通过无铜点击反应,将叠氮修饰的功能蛋白、多肽、荧光分子精准接枝到界面上,完全避免了传统戊二醛类交联剂容易出现的非特异性吸附、偶联位点不可控的问题。在多肽固相合成领域,它还可作为末端定点修饰试剂,在多肽的全局脱保护步骤完成后,直接引入DBCO活性基团,为后续的多组分多肽精准组装提供高选择性的反应位点。
该试剂常规状态下为白色或浅灰色结晶固体,可自由溶于二甲基亚砜、二氯甲烷、四氢呋喃等常见有机溶剂,长期储存需置于-20℃氩气等惰性气体保护环境中,严格避免与氨基、巯基类化合物混放导致活性位点提前失活。

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