Alexa Fluor546 Streptavidin，AF546链霉亲和素偶联物，AF546‑SA

Alexa Fluor546 Streptavidin，AF546链霉亲和素偶联物（AF546‑SA）为荧光染料‑蛋白偶联复合物，将Alexa Fluor546荧光发色基团共价偶联至链霉亲和素蛋白骨架之上。链霉亲和素蛋白拥有四组独立生物素结合口袋，可与生物素基团发生高亲和力非共价结合；Alexa Fluor546荧光单元激发波长556 nm，发射波长573 nm，荧光亮度高，光稳定性优异，染料通过与蛋白表面赖氨酸氨基偶联实现接枝，完整保留蛋白本身生物素识别结合位点。

该偶联物制备工艺一般采用AF546‑NHS活性酯与链霉亲和素蛋白液相偶联，严格控制染料投料摩尔比，防止染料过量修饰破坏蛋白三维空间结构。偶联结束后通过层析分离除去未反应游离染料分子，获得纯化后的AF546‑链霉亲和素产物。染料蛋白比值是关键指标，染料负载过高会屏蔽蛋白结合口袋，削弱生物素结合能力；染料负载过低则荧光信号强度不足。

该偶联物核心应用依托生物素‑链霉亲和素特异性识别体系。当材料、大分子底物预先接枝生物素基团，AF546‑链霉亲和素就可以特异性结合到生物素修饰位点，把AF546荧光标签引入目标体系。在固相基材改性研究中，基材表面修饰生物素‑PEG衍生物，再使用AF546‑链霉亲和素进行孵育，依靠荧光信号直观评估基材表面生物素接枝密度与分布均匀程度；也可用于生物素修饰微球、高分子组装体的荧光显色，表征组装体系的构建完成度。

链霉亲和素属于蛋白大分子，对温度、pH、变性试剂敏感，高温、强酸碱会造成蛋白变性失活，丧失生物素识别能力。储存条件为避光2‑8 ℃冷藏，禁止冷冻处理；工作稀释液建议临实验前配置，避免长时间放置造成蛋白降解。AF546‑链霉亲和素将生物素识别能力与荧光报告能力集于一体，依托成熟的生物素‑链霉亲和素作用体系，为各类生物素修饰体系提供便捷荧光读出方案。

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