mPEG‑MAL,甲氧基聚乙二醇马来酰亚胺,Methoxy‑PEG‑MAL
mPEG‑MAL(甲氧基聚乙二醇马来酰亚胺),又称mPEG‑Maleimide,Methoxy‑PEG‑MAL,α‑Methoxy‑ω‑Maleimide‑PEG,是单端封端的巯基特异性聚乙二醇修饰试剂,一端为惰性甲氧基,另一端为马来酰亚胺活性基团,中间为PEG柔性间隔链,是生物分子定点PEG化、纳米颗粒表面改性的经典工具分子。该试剂性状取决于PEG分子量,常见规格包含2k、5k、10k等,可溶于水、DMSO、DMF,低温干燥条件下保存,马来酰亚胺基团遇强碱会发生水解失活,需要严格控制储存与反应pH环境。
马来酰亚胺基团的特征反应是在pH6.5‑7.5弱中性条件下,和游离巯基(半胱氨酸残基‑SH)发生迈克尔加成反应,生成稳定硫醚共价键;该pH区间内,马来酰亚胺对于巯基反应活性远高于氨基,实现对巯基位点高选择性修饰,*大程度规避蛋白表面赖氨酸残基的随机非特异偶联,实现位点可控的PEG修饰效果。甲氧基端属于惰性封端基团,不会引入额外活性位点,修饰完成后只向目标分子引入一条亲水PEG链,不会造成分子间交联聚合。
在蛋白多肽修饰实验中,mPEG‑MAL用于修饰带有游离半胱氨酸的重组蛋白、多肽片段,PEG链包裹在分子外层,提升分子水溶性,降低分子间聚集倾向,减少非特异性相互作用。在纳米材料研究领域,广泛用于金纳米颗粒、量子点、聚合物纳米胶束的表面改性,颗粒表面引入游离巯基之后,与mPEG‑MAL发生偶联,在纳米颗粒外壳构建PEG水化层,抑制颗粒团聚,改善胶体分散稳定性,降低非特异性蛋白吸附,优化纳米颗粒的胶体行为。
反应体系pH是实验成败关键,pH低于6.5,巯基‑马来酰亚胺反应速率显著下降;pH高于7.5,马来酰亚胺水解速率加快,同时会提升和伯氨基副反应概率。反应体系中需要避免含有二硫苏糖醇、β‑巯基乙醇等游离巯基还原剂,还原剂会直接消耗试剂活性基团。针对蛋白样品,需要提前去除样品缓冲液中游离巯基杂质。该试剂凭借优异的巯基选择性,成为定点生物偶联、纳米界面改性领域使用频率*高的PEG衍生物。

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