Cy5.5‑SNA,Cy5.5标记黑接骨木凝集素,Cyanine5.5-Sambucus Nigra Lectin
Cy5.5‑SNA,中文名称Cy5.5标记黑接骨木凝集素,是近红外花菁染料Cy5.5共价偶联黑接骨木凝集素(SNA)制备的荧光凝集素探针,以近红外光谱特性适配深层组织与多色成像面板,靶向识别α-2,6连接唾液酸残基。黑接骨木凝集素为四聚体糖蛋白,特异性识别糖链末端α-2,6-Neu5Ac结构,对α-2,3唾液酸几乎无亲和力,是唾液酸糖苷键分型研究的核心工具。Cy5.5激发波长675 nm,发射波长694 nm,属于近红外荧光,摩尔消光系数高,荧光发射峰位置与Cy5、AF647等远红染料之间光谱分离度良好,串色少,可作为多色成像面板里的最远红外通道。
Cy5.5的长波长特征赋予探针更强的组织穿透能力,相比AF594、Cy3等可见光波段标记的SNA,Cy5.5‑SNA可以穿透更厚的组织样本,降低光散射带来的信号衰减,适合厚切片、组织块样本的成像采集。染料母核为花菁结构,具备良好的水溶性,偶联过程条件温和,不会剧烈扰动SNA蛋白的四级结构,保留凝集素天然糖结合活性。产品经过纯化去除游离Cy5.5染料,避免游离染料吸附于样本基质造成背景升高。在多色实验设计中,Cy5.5‑SNA常搭配绿色、橙红荧光凝集素探针,在同一样本中一次性区分多种不同糖链修饰,构建多维糖基化空间图谱。
使用时缓冲液pH维持中性区间,保障SNA糖结合口袋稳定,钙离子的存在有助于维持凝集素空间构象。实验设置游离唾液酸竞争对照,用来验证染色信号的特异性,排除非特异性蛋白吸附带来的假阳性。试剂避光低温保存,Cy5.5花菁染料对强光敏感,光照会加速光漂白,蛋白组分反复冻融容易变性失活。该探针广泛用于厚组织样本、三维细胞模型的α-2,6唾液酸化糖链成像,适配共聚焦、多光子显微平台,在多色糖链共定位研究中,作为近红外通道的核心凝集素探针,支撑复杂生物体系糖基化修饰的多维表征。

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