CF680‑UEA‑I,CF680标记荆豆凝集素I,CF680-Ulex europaeus agglutinin I
CF680‑UEA‑I,中文名称CF680标记荆豆凝集素I,是近红外荧光染料CF680与荆豆凝集素I偶联得到的凝集素荧光探针,主打厚样本、三维组织的深层荧光成像,特异性识别α-L-岩藻糖α-1,2-Gal糖苷键。荆豆凝集素I来自荆豆种子,二聚体蛋白结构,对α-1,2连接的L-岩藻糖具备高度专一识别性,是岩藻糖基化糖链的标志性探针。CF680属于近红外花菁类荧光染料,激发波长681 nm,发射波长698 nm,摩尔消光系数*高,荧光信号落在近红外区间,远离细胞与组织的内源自发荧光波段,大幅降低厚组织样本的背景噪声,组织穿透能力优于可见光、橙红波段染料,适合组织块、类器官等厚样本三维重构成像。
对比可见光波段荧光标记的UEA-I,CF680‑UEA‑I在厚样本成像上优势突出,可见光荧光容易在组织浅层被散射、吸收,而近红外荧光可以穿透更深的组织层,实现大体积样本内部岩藻糖基化糖链的三维空间测绘。偶联制备工艺会控制染料标记比例,平衡荧光亮度和凝集素蛋白活性,过多染料会产生空间位阻,遮蔽岩藻糖结合口袋;标记不足会造成荧光信号偏弱,难以检测低丰度岩藻糖修饰。成品去除游离CF680染料,减少非特异性背景荧光干扰。
实验操作时缓冲液需要维持合适钙离子浓度,保证UEA-I糖识别结构域稳定;染色工作液建议现配现用,避免染料长时间光照降解。该探针适合共聚焦、多光子显微成像系统,可搭配短波长荧光探针做多色标记,在三维样本中同时解析多种糖链分布。储存条件要求严格避光低温,光照会加速CF680染料光降解,反复冻融会造成凝集素蛋白变性失活。该试剂主要用于厚组织、类器官三维糖组成像,深层组织内岩藻糖基化修饰的空间分布观测,拓展了凝集素荧光探针在三维生物样本成像方向的应用边界。

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