​Cy3 Tyramide 荧光素Cy3酪胺 氰基-3-酪酰胺

Cy3 Tyramide 是一种基于 Cy3 荧光染料的化学增强底物，用于**酪氨酸信号放大（Tyramide Signal Amplification, TSA）**技术。这种化合物广泛用于免疫荧光、原位杂交（ISH）和其他需要增强荧光信号的实验中。

Cy3 Tyramide 的特点

荧光特性：

激发波长：~550 nm

发射波长：~570 nm

高亮度和光稳定性，适合高分辨率显微成像。

高灵敏度：

Tyramide 与辣根过氧化物酶（HRP）催化产生活性中间体，能共价结合到邻近的酪氨酸残基上，实现信号的显著放大。

高特异性：

在抗体介导的 HRP 酶作用下，反应仅限于标记区域，具有高度的空间精确性。

低背景：

信号增强与固定位置反应结合，显著降低非特异性背景。

主要应用

免疫荧光（IF）：

增强目标蛋白的荧光信号，在低丰度蛋白或弱表达分子研究中尤为重要。

原位杂交（ISH）：

放大核酸探针信号，用于 RNA 或 DNA 的高灵敏检测。

多重染色：

Cy3 Tyramide 可与其他荧光染料组合，进行多目标分子标记。

组织成像：

用于石蜡切片或冷冻组织切片的高灵敏检测。

实验注意事项

准备工作：

样品需预先通过 HRP 偶联抗体或探针标记。

反应条件：

Cy3 Tyramide 在 HRP 存在下形成活性自由基，与目标区域的酪氨酸共价结合。

反应通常在含过氧化氢的缓冲液（如 TSA 缓冲液）中进行。

避免过度反应：

反应时间需严格控制，通常为 5–10 分钟，防止非特异性标记。

封闭与洗涤：

为降低背景信号，在反应前后需充分封闭和清洗样品。

储存：

Cy3 Tyramide 需避光、低温（-20°C）保存，避免频繁冻融。