Sulfo-Cy3 Tyramide 磺酸基花青素Cy3 酪酰胺

Sulfo-Cy3 Tyramide 是一种水溶性的荧光信号放大试剂，结合了 Cy3 荧光染料和 Tyramide 技术，广泛应用于Tyramide Signal Amplification (TSA) 技术中。Tyramide 技术依赖辣根过氧化物酶（HRP）催化产生的活性中间体，通过与目标区域的酪氨酸残基共价结合，从而显著增强荧光信号。

Sulfo-Cy3 Tyramide 的特点

荧光特性：

激发波长：~550 nm

发射波长：~570 nm

Cy3 是一种常用的红色荧光染料，具有较强的荧光亮度和较好的光稳定性，适合高分辨率成像。

水溶性：

含有磺酸基团（-SO₃H），使其能够在水性环境中溶解，适合在生物学实验中使用，尤其是在细胞和组织样品中。

信号放大：

通过酪氨酸残基与 HRP 催化生成的活性中间体反应，增强信号强度。适合用于低丰度分子的高灵敏度检测。

高特异性：

仅在 HRP 存在时与目标分子反应，确保信号增强仅限于目标区域，减少非特异性背景。

主要应用

免疫荧光（IF）：

增强抗体标记的蛋白质荧光信号，特别适用于低丰度的目标蛋白。

原位杂交（ISH）：

用于增强 RNA 或 DNA 探针的荧光信号，适合检测低丰度的核酸分子。

组织切片成像：

用于增强组织或细胞切片中的标记信号，增加图像的可视化效果，尤其在复杂的组织结构中。

多重染色：

可与其他荧光染料结合进行多重标记，增加实验的多维度信息。

实验步骤

样品准备：

固定细胞或组织切片，进行封闭非特异性结合位点处理。

使用 HRP 偶联的初级或二级抗体标记目标分子。

Tyramide 反应：

配制含有 Sulfo-Cy3 Tyramide 的反应液，通常在含有过氧化氢（0.01%–0.03%）的缓冲液中进行孵育，时间通常为 5-10 分钟。

信号放大：

HRP 催化反应生成活性中间体，活性中间体与样品中酪氨酸残基反应，产生强烈的荧光信号。

洗涤与成像：

用 PBS 等缓冲液多次洗涤，去除未反应的染料。

使用支持 Cy3 荧光信号的显微镜进行成像。