Cy3 Tyramide 174961-75-2 氰基-3-酪酰胺

Tyramide-Cy3

Tyramide-Cy3 是一种结合了 Tyramide 信号放大技术和 Cy3 荧光染料的试剂，广泛应用于生物学实验中的信号增强，尤其是在免疫染色、原位杂交等技术中。它通过与辣根过氧化物酶（HRP）催化反应生成的活性中间体反应，从而显著增强目标分子的荧光信号。

Tyramide-Cy3 的特点

荧光特性：

激发波长：550 nm

发射波长：570 nm

Cy3 是一种红色荧光染料，具有较强的荧光强度和较好的光稳定性，非常适合在显微镜成像中使用。

信号放大功能：

Tyramide-Cy3 利用 Tyramide 信号放大技术，在 HRP 存在的情况下，Cy3 会与目标分子的酪氨酸残基反应，放大微弱的荧光信号，使其更加易于检测。

水溶性：

含有磺酸基团（-SO₃H），使其具有较好的水溶性，可以在水基缓冲液中使用，适合生物学实验中直接使用。

高特异性：

反应仅在 HRP 催化下进行，确保 Tyramide-Cy3 只在目标位置生成荧光信号，从而减少非特异性背景。

主要应用

免疫荧光（IF）：

适用于蛋白质或抗体标记，通过增强信号使得低丰度的目标蛋白也能够被检测到。

原位杂交（ISH）：

用于 RNA 或 DNA 探针的标记和检测，尤其适用于低丰度的核酸分子。

组织切片成像：

增强组织或细胞切片中标记物的信号，在复杂的组织中能获得更高的成像质量。

多重染色：

可以与其他荧光染料共同使用，进行多重标记，提供更多信息的可视化。

实验步骤

样品准备：

固定细胞或组织切片，并进行封闭处理，以防止非特异性结合。

使用 HRP 偶联的初级或二级抗体进行标记。

Tyramide-Cy3 反应：

将 Tyramide-Cy3 工作液加入样品中，通常在含有过氧化氢（0.01%–0.03%）的缓冲液中孵育，时间一般为 5–10 分钟。

在 HRP 存在的情况下，Tyramide 中间体与酪氨酸残基反应，产生强烈的 Cy3 荧光信号。

信号增强：

通过 Tyramide 信号放大，显著增加目标位置的荧光强度，增强灵敏度。

洗涤与成像：

用 PBS 或其他缓冲液洗涤，去除未反应的试剂。

使用适当的荧光显微镜（如支持 Cy3 荧光的显微镜）进行成像。